Genetics of Bacteria and...

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Chapter 15Genetics of Bacteria and

Bacteriophages

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CORSO GENETICA LAUREA TRIENNALE “ROMA TRE”

Prof. A. Antoccia

ANALISI GENETICA NEI BATTERI:

MAPPATURA MEDIANTE

A) CONIUGAZIONE

B) TRASFORMAZIONE

C) TRASDUZIONE

(GENERALIZZATA,SPECIALIZZATA)

RIPRODUZIONE ASESSUATE E

PROCESSI PARASESSUALI ATTRAVERSO LA

RICOMBINAZIONE-

UNIDIREZIONALITA’ DEL TRASFERIMENTO

GENICO

DIPLOIDI PARZIALI

NON IN TUTTI I

TIPI DI BATTERI

CON ECCEZIONE

TRASDUZIONE

TERRENI LIQUIDI E SOLIDI -

TERRENI SELETTIVI

MUTANTI PROTOTROFI E

AUXOTROFI (trp+ o trp-)

CAPACITA’ DI

UTILIZZARE ZUCCHERI

(lac+ o lac-)

RESISTENZA A FARMACI

ED ANTIBIOTOICI (ampR O ampS)

CONIUGAZIONE IN E. COLI- 1946 LEDEBERG & TATUM-

RARI PROTOTROFI 1 IN 106 CELLULE

TUBO DI DAVIS

1953-W. HAYES, UNIDIREZIONALITA’ DELLO SCAMBIO

GENETICO IN E. COLI

FATTORE F

CELLULA

DONATRICE

CELLULA

RICEVENTE

CEPPI DI E. COLI AD ALTA FREQUENZA DI

RICOMBINAZIONE:

High Frequency of Recombination

HFR H - (Hayes) - Sito di integrazione F, in

Prossimità di thr e leu

FATTORI F’

E SEXDUZIONE

MAPPATURA

PER

CONIUGAZIONE

1957- F. Jacob e E.

Wollman

Hfr H

thr+ leu+ azas tons

lac+ gal + strs

X F-

Thr- leu- azar tonr lac-

gal- strr

MEZZO SELETTIVO CON

STR E MANCANTE THR E

LEU, POI TRASFERITE

IN ALTRI MEZZI SELETTIVI

DONATRICI ERANO STR-

E THR+ LEU+

MAPPA per trasferire tutto cromosoma da ceppo

HFR aricevente F- circa 100 minuti

MAPPATURA DEI GENI NEI BATTERI PER

TRASFORMAZIONE

(SOLO NEI RICEVENTI COMPETENTI CHE

PRESENTANO RECETTORI SPECIFICI)

FRAMMENTI PARI ALLO 0.2-0.5% DEL CROMOSOMA

BATTERICO

IL DNA A SINGOLO FILAMENTO VIENE

PROTETTO DA PROTEINE DI RIVESTIMENTO