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Micotossine: limiti e destinazioni d’uso
Carlo Brera
Istituto Superiore di Sanità
DSPVSA – Reparto OGM e MicotossineMartedì 28 Febbraio 2012
CAMERA DI COMMERCIO INDUSTRIA
ARTIGIANATO E AGRICOLTURA DI TORINO
• Le micotossine sono sostanze tossiche (composti chimici) prodotte dal
metabolismo secondario di alcuni funghi filamentosi o muffe (Aspergillus,
Penicillium, Fusarium, Stachybotrys, Cephalosporium, ecc.)
• Sono tossine naturali, la cui presenza nell’ambiente NON è una
conseguenza dell’attività dell’uomo, ma delle condizioni ambientali che si
vengono a creare sul campo
• La crescita fungina e la formazione di micotossine avviene principalmente
su numerose specie vegetali e può causare seri rischi per la salute
dell’uomo e degli animali
• Campo di Aw < 0.85 –0.99 ; Tott. = 20°°°°C - 35°°°°C
• Sono sostanze dotate di elevato potere cancerogeno e genotossico (Aflatossina B1)
• Sono sostanze che manifestano tossicità croniche e raramente acute
• Sono sostanze termostabili
• Sono fortemente elettrostatiche
• Sono ubiquitariamente presenti sul territorio
• Sono fortemente caratterizzate da una incidenza di contaminazione “stagionale”
• Presentano una tipologia di contaminazione eterogenea
(a macchia di leopardo)
• Non presentano difficoltà da un punto di vista di determinazione analitica
• Presentano basso peso molecolare
Contaminazione Contaminazione ““perversaperversa”
• Possono essere formate da più specie fungine
• Una specie fungina può produrre più di una
micotossina
• La presenza di muffe sulla derrata non ènecessariamente indice di presenza di micotossine
• La assenza di muffe sulla derrata non ènecessariamente indice di assenza di micotossina
Determinanti di contaminazione fungina e produzione di micotossiDeterminanti di contaminazione fungina e produzione di micotossinene
• Determinanti riconducibili al clima� temperatura� umidità� Aw� piovosità
• Tipo di substrato (ricco in carboidrati, carenze minerali)Tipo di substrato (ricco in carboidrati, carenze minerali)Tipo di substrato (ricco in carboidrati, carenze minerali)Tipo di substrato (ricco in carboidrati, carenze minerali)
• Determinanti riconducibili alle pratiche di coltivazione
� attacco di insetti (varietà resistenti, piante GM)
� stress idrico della pianta
� suolo (salinità, pH, aridità)
� epoca e densità di semina
Interrelazione tra micotossine e uomoInterrelazione tra micotossine e uomo
Ceppo fungino
Mangimi
Micotossine Cereali e
semi oleaginosi
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INALAZIONEINALAZIONEINALAZIONEINALAZIONE
I piI piùù importanti funghi tossigeni e micotossine correlateimportanti funghi tossigeni e micotossine correlate
AflatossineAflatossineAflatossineAflatossine
FumonisineFumonisineFumonisineFumonisine
OcratossinaOcratossinaOcratossinaOcratossina AAAA
DeossinivalenoloDeossinivalenoloDeossinivalenoloDeossinivalenoloZearalenoneZearalenoneZearalenoneZearalenoneTTTT----2 e HT2 e HT2 e HT2 e HT----2222
Aspergillus flavus Aspergillus flavus Aspergillus flavus Aspergillus flavus Aspergillus parasiticusAspergillus parasiticusAspergillus parasiticusAspergillus parasiticus
Fusarium verticillioidesFusarium verticillioidesFusarium verticillioidesFusarium verticillioidesFusarium proliferatumFusarium proliferatumFusarium proliferatumFusarium proliferatum
Aspergillus ochraceusAspergillus ochraceusAspergillus ochraceusAspergillus ochraceusPenicillium verrucosumPenicillium verrucosumPenicillium verrucosumPenicillium verrucosum
Fusarium graminearumFusarium graminearumFusarium graminearumFusarium graminearumFusarium culmorumFusarium culmorumFusarium culmorumFusarium culmorum
Mais, frutta secca semi
oleosi, frumento, etc....
Mais, prodotti di
mais
Cereali, uvetta, caffè
Cereali (Grano,
avena, mais)
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PatulinaPatulinaPatulinaPatulina Penicillium expansumPenicillium expansumPenicillium expansumPenicillium expansum Frutta fresca, marmellate
succhi di frutta
Micotossine “maggiori”
Aflatossine (AFL B1, B2, G1, G2)
Ocratossina A (OTA)
Patulina (PAT)
Fusariotossine
•Tricoteceni
•Gruppo A: tossina T-2 e HT-2, Diacetossiscirpenolo (DAS)
•Gruppo B: Deossinivalenolo (DON), nivalenolo (NIV), 3-acetildeossinivalenolo (3-AcDON), 15-acetildeossinivalenolo (15-AcDON) colorati in ordine di tossicità
•Zearalenone (ZEA)
•Fumonisine (B1, B2, B3)
Materie prime suscettibili di
contaminazione
• Frutta secca ed essiccata
(mandorle, noci, nocciole,
fichi secchi, ecc)
• Caffè
• Cacao
• Spezie (peperoncino,
pepe, mostarda, zenzero
ecc)
• Liquirizia
• Cereali (frumento, mais,
orzo, avena, segale ecc.)
• Semi oleaginosi
(arachidi, girasole, semi di
cotone ecc.)
• Frutta e verdura (uva da
vinificazione, mele, pere,
carote, pomodori ecc)
Prodotti derivati suscettibili di
contaminazione da micotossine • Derivati dei cereali ad
uso umano ed animale
• Derivati dei semi oleaginosi esclusi gli oli raffinati
• Prodotti contenenti cioccolato
• Caffè
• Vino
• Birra
• Succhi di frutta e di
ortaggi
• Uvetta
• Prodotti contenenti
spezie
Prodotti di origine animale
potenzialmente contaminati da
micotossine
• Latte e derivati
• Carne di suini e derivati
• Carne di specie avicole
• Uova
Normativa Destinazioni d’uso
Alimenti Mangimi
Reg. 165/2010
Aflatossine nel
RISO
✔
Reg. 1881/2006 ✔Reg. 1126/2007 ✔Reg. 574/2011 ✔Racc. 576/2006 ✔Dir. 32/2002 ✔Decr 15 maggio
2006
✔
COMMISSION REGULATION (EU) No …/..
of XXX
amending Commission Regulation (EC) 1881/2006 of 19 December 2006 setting maximum levels for certain contaminants in foodstuffs as regards ochratoxin A,
zearalenone, non dioxin-like PCBs and melamine.
(c) The followiong point 2.2.13 is added:
"2.2.13. Wheat gluten not intended for direct human consumption
and/or not sold directly to the consumer
8,0 "
“ Attualmente il limite è 3 ug/kg
ug/kg
ug/kg
Forum sulle Fusariotossine
Per quanto riguarda il Forum, le conclusioni sono state:- T-2 ed HT-2 : verrà discussa la situazione con le Autorità competenti dei vari Paesi, dai quali sono stati inviati solo pareri preliminari. Ulteriori pareri e dati sono attesi a mezzo mail. - Con i Rappresentanti degli Stati UE si dovrà stabilire una posizione rispetto ai limiti proposti dal Codex- Verrà discusso il metodo di campionamento che dovrà essere uniformato per Feed e Food (gruppo di lavoro ad hoc)- Verranno chiesti pareri all’EFSA su altre micotossine. Alla base bisogna
prendere consapevolezza degli eventuali rischi in condizioni sfavorevoli e poi si valuterà il da farsi.
- Si dovranno approfondire le conoscenze su tossine legate, nascoste, mascherate, glicosilate ecc per capire se sono più o meno tossiche.- È necessario investire nella Dg Ricerca- Il problema delle micotossine è destinato a rimanere fortemente influenzato dal cambiamento climatico, pertanto si ha necessità di misure di tutela.
T2 + HT2 negli alimenti
Punti per la discussione
• Punti a favore di una fissazione di limiti
• Anche se non necessario in termini di salute pubblica è utile avere un limite per bloccare partite di alta contaminazione
• 91% della TDI raggiunta per i toddlers (parere EFSA)
• Punti contro la fissazione di limiti
• Mancanza di disponibilità di metodi di analisi
• Parere EFSA rassicurante (tranne forse per i bambini)
• Parere degli stakeholders (completamente negativo) [CAOBISCO, COPA-COGECA, COLDIRETTI, EUROPEAN MILLERS, CEEREAL]
• Eccessiva penalizzazione della MP, in particolare l’avena con aumento dei costi
La posizione italiana
• E’ prematuro fissare limiti su T2 e HT2
• Dati di consumo
• Dati di processo
• Dati di contaminazione
Possibile discussione su eventuali limiti da fissare
Ampliamento della Raccomandazione 576/2006
Decisione presa
• Per il momento, non si continua la discussione sui livelli
massimi, e si lavorerà su una Raccomandazione per a)
invitare i PM ad effettuare monitoraggi, b) ottenere info
per valutare l’effetto del processo tecnologico, c)
proporre dei livelli target (valori guida) per valutare
l’accettabilità dei prodotti del monitoraggio ma non la
conformità.
• I valori guida sarebbero destinati agli operatori per
valutare l’accettabilità per i prodotti destinati
all’alimentazione umana. Quindi livelli non molto
rigorosi ma valori guida.
crop/food levels T2 + HT2 (µg/kg)
barley unprocessed 200
corn grain unprocessed 150
oats unprocessed -with husk 1000
rice unprocessed no limit
wheat unprocessed 50
Processed cereal grains
crop/food levels T2 + HT2 (µg/kg)
barley grain for direct human consumption 25
corn grain for direct human consumption 25
oats grain for direct human consumption 50
rice for direct human consumption no limit
rye for direct human consumption 25
wheat for direct human consumption 25
Cereal products
crop/food levels T2 + HT2 (µg/kg)
all products derived from cereals 25
except
cereal bran 50
oat milling products 50
breakfast cereals including cereal flakes 50
DEOXYNIVALENOL
Commodity CX/CF 12/6/5
Description CX/CF 12/6/5
ML in CX/CF 12/6/5
(mg/kg)
EU maximum level
( mg/kg) Raw cereal grains
(wheat, maize and
barley)
Raw wheat, maize and barley
grain to be subject to sorting or
other physical treatment before
human consumption or before
use as an ingredient in other
foods
2.0 1.25 / 1.75 (1)
Semi-processed
products derived
from wheat, maize
and barley
Flour, semolina, meal, grits,
flakes, starch 1.0 0.75 /1.25 (2)
Cereal-based foods
for infants (up to 12
months) and young
children (12 to 23
months)
Cereal-based food for infants
and young children (e.g. infant
cereals, biscuits for infants and
young children, pasta for
infants and young children
0.5 0.2
(1) durum wheat ML = 1.75 // maize ML = 1.75 with the exception of
maize intended for wet milling (no ML)
(2)
Milling fractions maize < 500 micron: 1.25 // milling fractions maize
> 500 micron: 0.75
cereal flour other than maize: ML is 0.75
FUMONISINS 10/02/2011
Commodity
CX/CF 12/6/18
Description CX/CF 12/6/18
ML in CX/CF 12/6/18 (mg/kg)
EU maximum level
( mg/kg)
Corn/maize grain,
unprocessed
5.0 4.0 (1)
Corn/maize
flour/meal
2.0 2.0 / 1.4 (2)
(1) maize intended for wet milling not included
(2) milling fractions < 500 micron: 2.0 //milling fractions > 500
micron: 1.4
Micotossine emergenti
�DON�Fumonisine�Zearalenone�Aflatossine�Ocratossina�Tossina T2+HT2
�Moniliformina
�Enniatine
�Alcaloidi dell’ergot
�Beauvericina
�Diacetossiscirpenolo
�Fomopsine
�Citrinina
�Nivalenolo
�Alternaria
�Sterigmatocistina
�Micotossine
mascherate
Micotossine di vecchia conoscenza
•Cyclopiazonic acid (food/feed) –
Penicillium
•Mycophenolic acid – Penicillium
•Roquefortine (A,B) C – Penicillium
•Emodin – Aspergillus
•Penicillic acid – Penicillium
•Fusarenon-X – Fusarium
•Penitrem A (mainly feed - food (?) –
Penicillium
•Deoxynivalenol (toxicology and exposure
Il problema dove sta?
• Materie prime (Stagionalità, previsioni meteo)
• Sottoprodotti di lavorazione (attenzione alle specie animali più sensibili)
• Prodotti di molitura (distribuzione eterogenea delle micotossine nelle diverse frazioni di molitura)
• Prodotti finiti (dati disponibili?, info sui rapporti derivanti dall’effetto del processo tecnologico e delle ricette)
Gap normativi
• Coerenza tra i limiti tra MP e PF
• Fasce di consumatori (età post-infantile)
• Specie animali (cani e gatti ancora non presi in considerazione)
• Influenza della disponibilità dei dati per fissare un limite
Gap conoscitivi
• Ruolo dei maggiori contributors
• Effetto del processo tecnologico
• Database consumi
• Valenza delle soglie tossicologiche (anche sulla base di nuovi approcci metodologici)
• Esposizione di fasce di popolazione a rischio (issue mai preso in considerazione)
Ho appena chiesto di formare un tavolo di discussione condiviso tra Regioni, strutture
territoriali, operatori della filiera per approntare un Piano Nazionale di Controllo sugli alimenti di
origine vegetale per il controllo delle micotossine
�Armonizzare le procedure di controllo
�Raccogliere dati omogenei in modo sistematico
�Trasferire i dati a EFSA
�Essere pronti a gestire le emergenze
IV Congresso
"Le Micotossine nella filiera agro-alimentare”
ISS, 11-13 giugno 2012
Aflatossine-OTA-DON-FumonisineAnno 2011
Notifiche sui cereali - 2011
359 Notifiche in AA - 2011
22
40
11 6 7
122
5
146
0
20
40
60
80
100
120
140
160
ALTR
O
CHIM
ICO
(23
dioss
ine)
META
LLI PESAN
TI
RESID
UI D
I FAR
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I VETERI
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EI
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TOSSIN
E (121
aflato
ssin
e)
RESID
UI D
I PESTIC
I DI
Figura 42
Allerta (9) Origine Livelli di contaminazione
Aflatossine
Noce moscata Germania 8,9 ug/kg
Semi di cotone Grecia 36 ug/kg
Riso Basmati Pakistan 8,7 ug/kg
Deossinivalenolo
Grano Olanda 1700 ug/kg
OcratossinaUva sultanina Germania 12 ug/kg; 14 ug/kg
FumonisineFarina di mais Italia 1800 ug/kg; 8300 ug/kg; 3161 ug/kg
Border rejection (113) Origine
(N. di
notifiche)
Livelli di contaminazione
Arachidi per gli alimenti per gli uccelli India (38)
Argentina
Da 13 ug/kg a 1500 ug/kg;
102 ug/kg
Arachidi in guscio Cina (3) 120 ug/kg; 170 ug/kg; 4.6 ug/kg;
Arachidi
India (10) 289 ug/kg; 16 ug/kg; 5,2 ug/kg; 17,3 ug/kg; 58 ug/kg; 67,5 ug/kg; 94 ug/kg; 148 ug/kg; 10,7 ug/kg; 110 ug/kg (feed)
Egitto 113 ug/kg
Argentina (5) 9,4 ug/kg, 23 ug/kg; 8,5 ug/kg; 17 ug/kg; 14,3 ug/kg
Brasile (2) 21 ug/kg; 17 ug/kg
Nocciole Turchia 92 ug/kg
Pistacchi in guscio Turchia (3) 43 ug/kg; 42 ug/kg; 45 ug/kg;
Fichi secchi Turchia (33) Da 2,6 ug/kg a 102 ug/kg;
Cioccolato con pistacchi Turchia (3) 14,6 ug/kg; 40,6 ug/kg; 26,6 ug/kg
Riso basmati Pakistan (2) 9 ug/kg; 8 ug/kg biologico
Peperoncino interoTurmericNoce moscataPeperoncino in polvere
India (8) 7,2 ug/kg; 48,7 ug/kg; 59,2 ug/kg; 15,6 ug/kg16 ug/kg; 13,6 ug/kg; 24 ug/kg; 14,5 ug/kg
Mandorle in guscio USA (2) 64 ug/kg; 162 ug/kg;
Semi di melone India (2) 6,7 ug/kg; 7 ug/kg;
Mais India 10,9 ug/kg
Burro di arachidi USA 8 ug/kg;
Arachidi Argentina (4) 19 ug/kg, 31 ug/kg; 9,4 ug/kg, 8,5 ug/kg
Arachidi Sud Africa 47 ug/kg
Noce moscata Germania 9 ug/kg
Semi di cotone Grecia 36 ug/kg
Nocciole Azerbaijan (2) 11,9 ug/kg; 2,54 ug/kg;
Pistacchi in guscio Iran (2) 36,7 ug/kg; 74,1 ug/kg
OCRATOSSINA A
Uva secca UzbekistanAfghanistan
20 ug/kg, 24 ug/kg> 30 ug/kg; 20,1 ug/kg
Informazione (11) Origine Livelli di contaminazione
Aflatossine
Fichi secchi Turchia 16,7 ug/kg; 11,9 ug/kg
Latte Slovenia 183 ng/L
Latte Ungheria 72 ng/L
Torta di arachidiMais bianco
Nigeria 48 ug/kg6,7 ug/kg
Riso biologico Pakistan 7,8 ug/kg
Mais India 10,9 ug/kg
Deossinivalenolo
Farina di mais Polonia 1495 ug/kg
Pasta Polonia 1806 ug/kg
OcratossinaFarina di mais Polonia 4,5ug/kg