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L’importanza del campionamento per la validità dei risultati L’importanza del campionamento per la validità dei risultati. Eleonora Masala - Laboratorio di Prevenzione ASL della Provincia di Lecco Roma ISS 21 aprile 2015

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L’importanza del campionamento per

la validità dei risultati

L’importanza del campionamento per la validità dei risultati.

Eleonora Masala - Laboratorio di Prevenzione ASL della Provincia di Lecco

Roma ISS 21 aprile 2015

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INDIVIDUAZIONE DEI PUNTI DI MONITORAGGIO

PRESENTAZIONE LINEE GUIDA PER LA GESTIONE DELLE

FIORITURE NELLA ACQUE DI BALNEAZIONE

FREQUENZA DI CAMPIONAMENTO

ISPEZIONE VISIVA

MODALITA’ DI CAMPIONAMENTO

TRASPORTO E CONSERVAZIONE DEI CAMPIONI

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“Il punto scelto deve essere rappresentativo dell’acqua di balneazione e del tratto di costa cui si

riferisce. E’ possibile utilizzare un unico punto di campionamento per più spiagge, qualora questo sia

in grado di rappresentare in modo significativo (flusso di persone, rischio di inquinamento, flusso e

intensità delle correnti, ecc.) le acque relative ad un definito tratto di costa”.

Individuazione dei punti di monitoraggio:

Decreto attuativo 30-03-2010

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I punti di campionamento per quanto possibile dovrebbero coincidere con quelli per il controllo microbiologico

e comunque tenere conto di:

Individuazione dei punti di monitoraggio: Linee guida

Fruizione del corpo idrico (spiagge, sport acquatici)

Caratteristiche e omogeneità dei tratti di costa (foci corsi d’acqua , venti caratteristici)

Dati storici

Grado di antropizzazione

Presenza di fonti di alterazione dell’equilibrio chimico fisico del corpo idrico

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Individuazione dei punti di monitoraggio: ASL di Lecco

Il monitoraggio della balneabilità coinvolge due servizi ASL

Servizio igiene e sanità pubblica

(SISP)

Definizione punti di campionamento,

campionamento, emissione del giudizio

di balneabilità, gestione portale acque,

gestione rapporti con i sindaci

Laboratorio di prevenzione (LP) Esecuzione analisi (microbiologico,

monitoraggio dei cianobatteri e test

tossicologici)

Il campionamento è un’attività congiunta SISP –LP ( 1 operatore per servizio)

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Individuazione dei punti di monitoraggio

in provincia di Lecco

Il SISP ha definito i punti di monitoraggio sulla base dei seguenti criteri:

•Affluenza (il controllo va fatto nei punti con maggior affluenza di bagnanti e in quelle aree dove

vengono svolti sport acquatici)

• Rischio (devono essere controllati i punti con maggior rischio d’inquinamento).

•Presenza di fonti di alterazione dell’equilibrio chimico-fisico del corpo idrico

Il SISP rivaluta ogni anno i punti balneabili dei dati analitici precedenti .

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Area del Lago monitorata dall’Asl di Lecco

20 punti di campionamento.

Lago di Pusiano

2 punti di

campionamento per

la prov. di Lecco e

Como

Inquadramento geografico dell’area monitorata in provincia di Lecco

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Frequenza di monitoraggio: linee guida

Il monitoraggio deve essere effettuato durante la stagione balneare

In caso di utilizzo del corpo idrico per sport acquatici è consigliabile

effettuare il monitoraggio anche in altri periodi.

Medesima frequenza del campionamento microbiologico con

modifiche in funzione della fase (routine-allerta o emergenza)

in cui ci si trova

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Frequenza di monitoraggio: linee guida

TRASPARENZA ≥ 1m TP < 20 µg/l

TRASPARENZA ≥ 1m TP > 20 µg/l

CB tot < 2.000 cell/ml

TRASPARENZA < 1m TP > 20 µg/l

CB tot < 20.000 cell/ml

Campionamento MENSILE

Campionamento MENSILE e

ispezione visiva SETTIMANALE

Campionamento QUINDICINALE

e ispezione visiva SETTIMANALE

RO

UT

INE

ALL

ER

TA CB tot > 20.000 cell/ml e MC-LR

eq < 20 µg/L

Campionamento SETTIMANALE e

ispezione visiva OGNI DUE GIORNI

EM

ER

GE

NZ

A PRESENZA DI SCHIUME IN SUPERIFICIE

MC-LR eq >20 µg/L

CB > 100.000 cell/ml o ATX-a o CYN >

20µg/l

FREQUENZA CAMPIONAMENTO COME IN

FASE DI ALLERTA

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Frequenza di monitoraggio in provincia di Lecco

Il monitoraggio dei cianobatteri viene effettuato con

cadenza mensile anche al di fuori della stagione balneare

(sport acquatici)

Primo campionamento ad Aprile

Cadenza QUINDICINALE da Maggio a Settembre (in questo

periodo solitamente CB totali >20.000 cell/ml)

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Ispezione visiva: linee guida

Le linee guida danno molta enfasi all’ispezione visiva che consente osservare l’evoluzione

delle fioriture o di identificare i segni di una potenziale fioritura e valutare quindi la

necessità di campionamenti aggiuntivi per discriminare:

FIORITURE

INQUINAMENTI DI

ALTRA NATURA

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Ispezione visiva: linee guida

Alterazioni nella colorazione

Aumento della torbidità

Si devono osservare i fenomeni che possono essere indicativi di fioriture:

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Ispezione visiva: linee guida

Presenza di sospensioni gelatinose o schiume

Casi di sofferenza della fauna acquatica

Lago di Lecco: Fioritura P. rubescens gennaio 2013

Pusiano Fioritura D. lemmermannii luglio 2010

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Ispezione visiva

Nel corso degli anni si è rivelata utile la

sensibilizzazione della polizia locale dei

paesi rivieraschi e dei cittadini che

hanno segnalato tempestivamente le

anomalie nell’aspetto dell’acqua .

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Campionamento: linee guida

I campioni devono essere prelevati in quantità sufficientemente

rappresentative

MONITORAGGIO: insufficienti quantitativi d’acqua potrebbero non consentire la

raccolta di cluster di colonie che tendono ad accumularsi in determinati punti anche

a causa del loro rivestimento mucillaginoso.

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Campionamento di campioni di acqua:linee guida

Roma ISS 21aprile 2015

Effettuare il prelievo nei primi 5-10 cm di acqua

Riempire la bottiglia campionatrice immergendola ancora

chiusa e aprendola alla profondità giusta e chiuderla ancora in

immersione

Svuotare il 20 % del contenuto per favorire

l’omogeneizzazione

Trasportare la bottiglia al buio e al fresco in laboratorio

All’arrivo in laboratorio effettuare i sub-campionamenti previa

omogeneizzazione

I volumi dei sub-campioni

variano in funzione delle

analisi da effettuare

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Campionamento di campioni di acqua:linee guida

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250 ml per il monitoraggio

1 litro per i test tossicologici

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Campionamento di campioni di schiume:linee guida

Roma ISS 21aprile 2015

Prima di effettuare il prelievo miscelare la schiuma con lo strato di acqua sottostante

Procedere come per il campionamento di acqua

Trasportare la bottiglia al buio e al fresco in laboratorio

All’arrivo in laboratorio effettuare i sub-campionamenti previa omogeneizzazione

Effettuare il campionamento nel punto di massimo spessore della schiuma

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Campionamento acqua in colonna:linee guida

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Utilizzare bottiglie tipo Niskin o Van Dorn

Effettuare campionamenti discreti a diverse profondità

Il campione integrato risulta dall’insieme dei campioni discreti raccolti a

varie profondità e miscelati in opportuni contenitori o prelevati in un

tubo lungo quanto lo spessore della colonna che si vuole campionare.

Il campione in colonna: fornisce informazioni sulla distribuzione della

popolazione dei cianobatteri

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Campionamento cianobatteri bentonici:linee guida

Roma ISS 21aprile 2015

Massi : grattare con un bisturi

sterile un po’ di materiale in tubi

sterili tipo Falcon da 50 ml

Conservare il campione al fresco e al buio fino all’arrivo in laboratorio

Questo campionamento si effettua se nei primi metri della battigia si vedono ciottoli o sedimento

coperti da materiale mucillaginoso

Sedimento prelevare due o tre

carote in tubi sterili tipo Falcon

da 50 ml

Macroalghe ricoperte da

biofilm prelevare un

frammento di macroalga

in una busta di plastica

sterile

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Trasporto e conservazione dei campioni :linee guida

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Fissare i campioni per la conta entro 8 ore dal campionamento con una quantità

appropriata (2,5 ml per ogni l d’acqua) di Lugol (1%) o formalina (2,5%)

destinate alla conta cellulare

Il campione integrato risulta dall’insieme dei campioni discreti a varie profondità

miscelato in opportuni contenitori o prelevato in un tubo lungo quanto lo spessore

della colonna che si vuole campionare.

Trasportare i campioni in laboratorio al buio e refrigerati

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Trasporto e conservazione dei campioni

I campioni devono essere trasportati in laboratorio per l’analisi nel più breve

tempo possibile, al buio e refrigerati.

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Entro 8 ore dal campionamento bisogna fissare le aliquote destinate alla conta cellulare

con una quantità appropriata (2,5 ml per ogni l d’acqua) di Lugol (1%) ed entro 24h

effettuare il trattamento dei campioni per la ricerca delle tossine algali.

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Trasporto e conservazione dei campioni: linee guida

CONTA ALGALE E STIMA

BIOMASSA

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BOTTIGLIE PULITE DI

PLASTICA O VETRO

TEST TOSSICOLOGICI

BOTTIGLIE SCURE IN VETRO

CON TAPPO IN TEFLON O

MATERIALE INERTE

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Campionamento in provincia di Lecco

I campionamenti vengono effettuati grazie alla gratuita collaborazione della Provincia di Lecco che,

secondo il calendario, mette a disposizione un’imbarcazione e un agente per accompagnare gli

operatori dell’ASL.

Roma ISS 21 aprile 2015

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Campionamento in provincia di Lecco

Il monitoraggio di routine vene effettuato ad una profondità di circa 10 cm sotto il pelo libero

dell’acqua ad una distanza dalla battigia tale che il fondale abbia una profondità tra gli 80 e i 120 cm;

in corrispondenza di scogliere a picco o di fondali rapidamente degradanti i prelievi vengono

effettuati vicino alla scogliera o alla battigia.

In caso di fioriture i campionamenti vengono effettuati anche nei punti di maggior

accumulo.

Roma ISS 21 aprile 2015 “

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• Bottiglie scure in plastica /vetro da 1 l

• Etichette

• Biro

• pHmetro

• Termometro

• Anemometro

• Disco (Secchi).

Attrezzature e strumenti

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Equipaggiamento e dispositivi di sicurezza per il campionamento

“Il personale addetto al campionamento deve essere adeguatamente protetto al fine di ridurre

l’esposizione alle cianotossine potenzialmente presenti.

• Bastone per il prelievo

• Guanti nell’eventualità di dover immergere le mani in acqua

• Calzature idonee

• Life (nel caso di campionamenti dalla barca)

Formazione del personale addetto

Per ridurre il rischio

Dotazione di adeguati DPI

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Parametri da rilevati durante il campionamento

�Trasparenza (cm);

Temperatura (°C) dell’aria e dell’acqua;

Vento: direzione (provenienza in funzione dei punti cardinali) e intensità (debole,

medio, forte);

�Stato del lago (calmo o mosso, onde etc)

�Condizioni meteorologiche: presenza di pioggia (assente, lieve, moderata, intensa);

pH

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Linee guida per la gestione delle fioriture nelle acque di balneazione

Roma ISS 21 aprile 2015

La distribuzione spaziale e temporale dei cianobatteri e i livelli di tossicità possono essere

soggetti a cambiamenti repentini in funzione dei ceppi responsabili e delle caratteristiche

del bacino

In certi casi le colonie possono essere trasportate in prossimità di rive, porti o baie e ciò

rende difficoltoso il monitoraggio e di conseguenza la valutazione del rischio.

…un caso emblematico

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PUNTO DI PRELIEVO “UFFICIALE” effettuato a 10 metri dalla riva con un’imbarcazione:

•Densità algale: 12.000.000 cell/l

•Tossine: <1 ug/l

…un caso emblematico

Bosisio p. – fioritura di D. lemmermannii. luglio 2010

Roma ISS 21aprile 2015

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Densità algale > 100.000.000.cell/l

Tossina > 25 ug/l

A RIVA l’acqua si presentava così…

Un caso emeblematico….

Schiume maleodoranti, evidente alterazione della colorazione dell’acqua

Roma ISS 21 aprile 2015

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E’ pertanto di estrema importanza la raccolta organica dei dati di monitoraggio

per una rivalutazione del rischio, in quanto un sistema “RIGIDO” rischia di portare

a sottostimare il rischio nel caso delle fioriture.

Conclusioni

Roma, ISS 21 aprile 2015

Per poter essere rappresentativi i punti di prelievo devono essere soggetti a

periodica rivalutazione sulla base dell’analisi dei dati storici

L’osservazione dell’ambiente da parte degli operatori è fondamentale così come la

tempestiva raccolta delle segnalazioni di cittadini e figure che operano sul territorio.

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Grazie per l’attenzione!!!!

Eleonora Masala

LSP ASL Lecco

[email protected]