CRIOCONSERVAZIONE OVOCITARIA: Congelamento lento e vitrificazione Dott. Furlan Valentina 22 marzo...

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CRIOCONSERVAZIONE OVOCITARIA: Congelamento lento e vitrificazione Dott. Furlan Valentina 22 marzo 2010

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CRIOCONSERVAZIONE OVOCITARIA:

Congelamento lento e vitrificazioneDott. Furlan Valentina

22 marzo 2010

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PerchéPerché ricorrere al Congelamento Ovocitario?

Alternativa (obbligata) al congelamento embrionale LEGGE

40/2004 art 14 p.to 1: “è vietata la crioconservazione e la sopressione di embrioni, fermo

restando quanto previsto dalla legge 22 maggio 1978, n.194.”

Ovociti sovranumerari: LEGGE 40/2004 art 14 p.to 2: “le tecniche di

pruduzione degli embrioni, tenuto conto dell’evoluzione tecnico-scentifica e di quanto previsto dall’articolo 7, comma 3, non devono creare un numero di embrioni superiore a quello strettamente necessario ad un unico e contemporaneo impianto, comunque non superiore a 3.”

Preservare la fertilità in pazienti oncologiche;

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Valutazione dei parametri di selezione ovocitaria e di numero di ovociti neccessari a garantire un trasferimento.

Valutazione clinica delle tecniche:GravidanzeDi impiantoGruppo di pazienti

Scopo della ricerca:Dati ISSCongelamento lento12% grav. Cliniche31% aborti

Dati ISSFivet /icsi 24% grav. Cliniche18% aborti

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Caratteristica morfologica

Globulo polare

Citoplasma zona di addensamento

Citoplasma vacuolato

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Congelamento lentoValutazione della tecnica:

N°ovociti crioconservati

145

N°ovociti scongelati 145

N°ovociti ritrovati 134

92 %

N°ovociti sopravvisuti 92 68 % (su ovociti trovati)

63 %

(su ovociti crio)

N°ovociti degenerati 16 38 % Nella prima soluzione

26 62 % Alla fine dello scong.

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Congelamento lentoValutazione della tecnica:

N°ovociti sopravvisuti

63 % (su ovociti crioconservati)

Globulo polare congelamento Sopravvissuti g.p

g.p integro 59 (41%) 48 (81%)

g.p rugoso 43 (29%) 20 (46%)

g.p frammentato 43 (30%) 5 (11%)

citoplasma congelamento sopravvissuti

Normale 38 (65%) 32 (84%)

Vacuoli 8 (14%) 2 (25%)

Zone addensamento 12 (21 %) 3 (25%)

No IceThanks !

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Vitrificazione Valutazione della tecnica:

N°ovociti crioconservati

109

N°ovociti scongelati 109

N°ovociti ritrovati 102

93 %

N°ovociti sopravvisuti 87 85% (su ovociti trovati)

80% (su ovociti crio)

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Vitrificazione Sistema aperto: contatto diretto con azotoValutazione della tecnica:

N°ovociti sopravvisuti

80% (87 su 109) (su ovociti vitrificati)

Globulo polare congelamento presenza g.p

g.p integro 65 (59%) 61 (93%)

g.p rugoso 27 (25%) 20 (74%)

g.p frammentato 17 (15%) 4 (23%)

citoplasma congelamento sopravvissuti

Normale 38 (66%) 33 (86%)

Vacuoli 9 (16%) 2 (22%)

Zone addensamento 10 (17 %) 3 (30%)

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Conclusioni Congelamento lento:

Vitrificazione:

Minimo 6 ovociti maturi sovrannumerariCon globulo polare integroCon citoplasma normale

Minimo 4/5 ovociti maturi sovrannumerariCon globulo polare integro o rugosoCon citoplasma normale

63% sopravvivenza81% ov. Con g.p.integro84% ov. Con cit. normale

80% sopravvivenza93% ov. Con g.p.integro e 74% g.p.rugoso86% ov. Con cit. normale

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Congelamento lento risultati da gennaio 2008 a dicembre 2009

Cicli congelamento Cicli a fresco

Cicli congelati 59

Cicli scongelati 39 Cicli pick-up 110

Ov congelati 472 Ovociti raccolti 1067

Ov.scong 246 Ovociti maturi 842(79%)

Ov sopravv 152(62%)

Ov.inseminati 114 Ov.inseminati 307

Ov.fertilizzati normali

93 (81,5%)

Ov.fertilizzati 283 (92%)

Embrioni trasferiti 93 Embrioni trasferiti

278

Embrioni di B.Q 57 (61%) Embrioni di B.Q 195 (70%)

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Congelamento lento Dati clinici

Cicli congelamento Cicli a fresco

Cicli scongelati

39

Cicli trasferiti 38

Gravidanze 8 (21%) 33%

Grav.biochi 1 17%

Grav.cliniche 7 (18%) 28%

Aborti 2 (28%) 22%

Grav.evolutive 5 (13%) 21%

Impianto 9/93 (9,6%) 12%

Dati ISS12% grav. Cliniche31% aborti

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Congelamento lentoValutazioni per fattore maschile

Valutazione per fattore età

Fattore maschile

Cicli sc

% sopr %fert. %grav

normozoospermia 10 68% 87% 3 ( 30% cl)

teratozoospermia 12 77% 86% 1(8% cl)

Oligozoospermia 14 56% 66% 3(21% cl)

Azoospermia 2 57% 83% 0

età <35 >35<38

>38

Cicli trasferiti 19 13 6

Gravidanze 6 (31%)

2 (15%)

0

Grav.biochi 1 0 0

Grav.cliniche 5 (26%)

2 (15%)

0

Aborti 2 (40%)

0 0

Grav.evolutive 3 (16%)

2 (15%)

0

No congelamento azospermici

No congelamento sopra i 38 anni

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vitrificazione risultati da gennaio a dicembre 2009

Cicli congelamento Cicli a fresco

Cicli congelati 25

Cicli scongelati 10 Cicli pick-up 110

Ov congelati 179 Ovociti raccolti 1067

Ov.scong 54 Ovociti maturi 842(79%)

Ov sopravv 43 (79.6%)

Ov.inseminati 34 Ov.inseminati 307

Ov.fertilizzati normali

28(83%) Ov.fertilizzati 283 (92%)

Embrioni trasferiti 28 Embrioni trasferiti

278

Embrioni di B.Q 17(60%) Embrioni di B.Q 195 (70%)

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vitrificazione Dati clinici

Cicli congelamento Cicli a fresco

Cicli scongelati

10

Cicli trasferiti 10

Gravidanze 2 (20%) 33%

Grav.biochi 0 17%

Grav.cliniche 2 (20%) 28%

Aborti 0 22%

Grav.evolutive 2 (20%) 21%

Impianto 3/17 (17,5%)

12%

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Conclusioni

Minimo 6 ovocitiCon globulo polare

integroCon citoplasma

normale

Congelamento lento Vitrificazione

Minimo 4/5 ovocitiCon globulo polare

integro o rugosoCon citoplasma

normale

18% grav.clin28% abortoNo pz azoospermiciNo pz al di sopra di 38 anni

20% grav.clin 0% aborto

Dati ISS12% grav. Cliniche31% aborti

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Congelamento lento o vitrificazione?Congelamento lento o vitrificazione?lento: lenta disidratazione

rischio di formazione di cristalli richiesto strumento

lento controllo del congelamento bassi livelli di crioprotettore (meno tossicità) buoni risultati standardizzato

vitrificazione congelamento veloce alti livelli di crioprotettore (tossicità?) rischi di contaminazione azoto

non formazioni di cristalli non richiesto strumento ottimi risultati ma non standardizzati