1. DEGENERAZIONIDEGENERAZIONIDEVIAZIONI METABOLICHE DEI TESSUTI ACCOMPAGNATE DA ACCUMULO DISOSTANZE CHE NORMALMENTE NON VI SONO CONTENUTE AFFATTO OD IN MISURAMINORE CELLULARI/EPITELIALICONNETTIVALI RIGONFIAMENTO TORBIDO DEGENERAZIONE AMILOIDE DEGENERAZIONE VACUOLARE DEGENERAZIONE IALINA CONN. DEGENERAZIONE IDROPICADEGENERAZIONE FIBRINOIDE DEGENERAZIONE IALINA EPITELIALE DEGENERAZIONE MUCOSA CONN. DEGENERAZIONE GRASSA

2. MODIFICAZIONI BIOCHIMICHE NELLE CELLULE DANNEGGIATE ingresso di Na+ e fuoriuscita di K+ ed aumento di acqua intracellulare alterazione dellattivit delle pompe ioniche elevata perdita e mancata reintegrazione di ATP- maggior richiesta di ossigeno e di substrati metabolici quali glucosio- attivazione della glicolisi anaerobia ed aumento del piruvato e lattato diminuzione del pH intracellulare- riduzione delle sintesi macromolecolari risposta cellulare da stress (HSPs, ubiquitina) aumento elevato di ioni Ca nel citosol attivazione di proteasi (calpaine), fosfolipasi ed endonucleasi danno della membrane (plasmatica, mitocondriale, RE, lisosomiale) aumento dei ROS e diminuzione di sistemi antiossidanti transizione di permeabilit mitocondriale rilascio di enzimi lisosomiali 3. ALTERAZIONI MORFOLOGICHE NELLE CELLULE DANNEGGIATEDanno reversibile o subletale Rigonfiamento di alcuni mitocondri Rigonfiamento cellulare e del reticolo endoplasmatico Vacuolizzazione Autofagia da rimozione delle componenti danneggiateDanno irreversibile o letale Perdita dei nucleoli Disaggregazione e perdita dei ribosomi Rigonfiamento di tutti i mitocondri e degli organuli Condensazione nucleare con progressiva disgregazione del nucleo Formazione di vescicole (blebs) e di pori della membrana plasmatica Frammentazione di tutte le membrane interne e rottura dei lisosomi 4. NON SEMPRE IL DANNO CELLULARE SIEVIDENZA MORFOLOGICAMENTE, SPECIENELLE SUE FASI INIZIALICHE SIA VISIBILE O MENO, ALLA BASE DELDANNO CE UNA LESIONE BIOCHIMICAGENERALMENTE RICONDUCIBILE A:-BLOCCO TOTALE O PARZIALE DI ATTIVITAENZIMATICHE-DIFETTO CONGENITO-MODIFICAZIONE PERMEABILITA SELETTIVADI MEMBRANE 5. DEGENERAZIONI CELLULARI/EPITELIALICON ACCUMULO DI ACQUARIGONFIAMENTO TORBIDODEGENERAZIONE VACUOLAREDEGENERAZIONE IDROPICADEGENERAZIONE PALLONIFORMECON ACCUMULO DI PROTEINEDEGENERAZIONE IALINA-EPITELIALECON ACCUMULO DI LIPIDIDEGENERAZIONE GRASSADA DEFICIT ENZIMI LISOSOMIALIDA ACCUMULO DI SOSTANZE ESOGENE NON DEGRADABILITESAURISMOSI, PIGMENTAZIONI 6. RIGONFIAMENTO TORBIDOMACROSCOPIA-ORGANI PALLIDI, GRIGIASTRI, AUMENTATI DI VOLUMEMICROSCOPIA-AUMENTO DI VOLUME DELLA CELLULA-LIMITI CELLULARI INDISTINTI-MITOCONDRI RIGONFI-GRANULOSITA DIFFUSA NELLE CELLULE (TORBIDITA)-AUMENTO DI VOLUME DEL NUCLEOQUESTO TIPO DI ALTERAZIONE CARATTERIZZATA DA DISFUNZIONEMITOCONDRIALE COLPISCE SOPRATTUTTO GLIORGANI PARENCHIMATOSIFEGATO, RENE, MIOCARDIONEL MIOCARDIO E NEL MUSCOLO I MITOCONDRI SONO INTERPOSTI TRALE FIBRILLE E RIGONFIANDOSI LE DISSOCIANO E NEL CONTEMPOVENGONO LIMITATI NELLA ESPANSIONE 7. LAUMENTO DI VOLUME CELLULARE COMPORTA UNA RIDUZIONE DEL LUME DEI VASI RIDUZIONE DEGLI SPAZI DI DISSE DEL FEGATOCOMPRESSIONE SINUSOIDI E CANALICOLI BILIARISTASI / DIFFICOLTA DI PERFUSIONE SANGUIGNARENE LAUMENTO DI VOLUME DELLE CELLULE TUBULARI PORTA ARIDUZIONE DEL LUME, CHE IN ALCUNI CASI RISULTA QUASI OBLITERATO 8. CAUSEPROCESSI TOSSICI FENOLI ALOGENATI TIROXINA A DOSI ELEVATEPROCESSI TOSSI-INFETTIVI TOSSINE BATTERICHEINIZIO DI PROCESSI DI IPERTROFIA FEGATO RESIDUO DOPO EPATECTOMIA PARZIALE(mitocondri aumentati di volume funzione e ATP) volume RENE SUPERSTITE DOPO MONONEFRECTOMIA 9. H2O NaNa H2OH2O Na Na H O 2Pompa del sodioPompa del sodioATP ATP Tossico O2 O2 10. AZIONE TOSSICA ALTERAZIONI MITOCONDRIALI I MITOCONDRI DELLE CELLULE IN RIGONFIAMENTO TORBIDO PRESENTANOUN CERTO GRADO DI DISSOCIAZIONE DELLE FOSFOSILAZIONI DALLEOSSIDAZIONI E TALVOLTA RIDOTTA CAPACITA RESPIRATORIA IL CONTENUTO DI ATP DELLA CELLULA E DIMINUITO INADEGUATO FUNZIONAMENTO DELLE VARIE POMPE CELLULARI DANNO PIU GRAVE: POMPA Na+ INGRESSO DI ACQUA RICHIAMATA DALCOMPARTIMENTO INTERSTIZIALE ACCUMULO INTRACELLULARE RIGONFIAMENTO CELLULAREQUANDO IL RIGONFIAMENTO MITOCONDRIALE E ELEVATO NECROSI OAPOPTOSI CELLULAREN.B. L AUMENTO DEL VOLUME CELLULARE E DOVUTO ANCHE ADUNAUMENTATA SINTESI DI PROTEINE, SPECIALMENTE PROTEINE DELLOSTRESS 11. LA REVERSIBILITA DEL RIGONFIAMENTO TORBIDO DIPENDE DAL GRADO DISQUILIBRIO ENERGETICOSQUILIBRIO ENERGETICO: AUMENTO CONSUMO O2_ GRADO DI DISSOCIAZIONE FOSF. OSSIDATIVA 12. DEGENERAZIONE VACUOLAREE CARATTERIZZATA DALLA COMPARSA NELLE CELLULE DI UN NUMEROPIU O MENO GRANDE DI VACUOLI CITOPLASMATICII VACUOLI POSSONO ESSERE DI VARIE DIMENSIONI, TONDEGGIANTI ODOVALI APPARENTEMENTE VUOTI ED EFFETTIVAMENTE CONTENENTI UNMATERIALE DEBOLMENTE EOSINOFILO COLORAZIONE ROSAMACROSCOPIA-ORGANI PALLIDI, GRIGIASTRI, AUMENTATI DI VOLUMEMICROSCOPIA-AUMENTO DI VOLUME DELLA CELLULA-ACCUMULO DI ACQUA E PROTEINE PLASMATICHE IN AMPI VACUOLIDELIMITATI DA UNA MEMBRANA SINGOLA ED IN RAPPORTO CON ILSISTEMA FAGO-LISOSOMIALE (COMPAIONO NELLA PORZIONE CELLULARERIVOLTA VERSO I VASI E POI SI DIFFONDONO NEL CITOPLASMA)-MICRO-, MACROVACUOLI, VESCICOLEQUESTO TIPO DI ALTERAZIONE COLPISCE SOPRATTUTTO GLIORGANI PARENCHIMATOSIFEGATO, RENE, MIOCARDIO 13. INIZIALMENTE REVERSIBILE, PER SUCCESSIVA ESTENSIONE DEI VACUOLIDIVIENE IRREVERSIBILE CON ALTERAZIONI DEGLI ORGANICause:-IPOSSIA-INFEZIONI (VIRUS)-MICOTOSSICOSI (Anche amanita phalloides)-INTOSSICAZIONI DIVERSEOLTRE ALLACQUA NEI VACUOLI SI ACCUMULA ALBUMINA DI DERIVAZIONEPLASMATICA.I VACUOLI POI SI FONDONO CON I LISOSOMI 14. IPOSSIA CARENZA PARZIALE DI OSSIGENOIPOSSIA IPOSSICA DIMINUZIONE DELLA PRESSIONE PARZIALE DI O2 NELSANGUE ARTERIOSOIPOSSIA STAGNANTE RISTAGNO DI SANGUE NEI TESSUTI PERRALLENTAMENTO DEL CIRCOLO OD OSTRUZIONE VENOSAIPOSSIA ANEMICA DIMINUZIONE DEL CONTENUTO DI EMOGLOBINA NELSANGUE CON RIDUZIONE DI FUNZIONE DI TRASPORTO DI O 2 NEL SANGUEIPOSSIA ISCHEMICA RIDUZIONE DELLA PERFUSIONE DI UN ORGANOIPOSSIA ISTOTOSSICA INIBIZIONE DEI PROCESSI RESPIRATORI AD OPERADI AGENTI TOSSICILANO/IPOSSIA IPOSSICA E STAGNANTE SONO TRA LE CAUSE PIU COMUNIDI DEGENERAZIONE VACUOLARELANO/IPOSSIAISTOTOSSICA(PROVOCATADAI VELENIDELLARESPIRAZIONE) DA PIU FREQUENTEMENTE RIGONFIAMENTO E NECROSICELLULARE 15. COME REPERTO AUTOPTICO QUESTA DEGENERAZIONE VIENE SPESSO TROVATA NEISOGGETTI MORTI PER ASFISSIA- SOGGETTI CHE HANNO RESPIRATO ARIA CON BASSA TENSIONE PARZIALE DI O2- INTOSSICATI DA MONOSSIDO DI CARBONIO- SUICIDI CON GASALTRE CONDIZIONI DI COMPARSA DI DEGENERAZIONE VACUOLARE:INSUFFICIENZE RESPIRATORIEINSUFFICIENZE DEL CIRCOLOVARI TIPI DI SHOCKLA DEGENERAZIONE E CARATTERIZZATA DALLINGRESSO NELLE CELLULE DIMATERIALE PLASMATICO 16. DIMINUZIONE TENSIONE DI O2DEFICIT ENERGETICO CELLULARE (FOSF. OSSIDATIVA) LIVELLI ATP RIDOTTA FUNZIONALITA DELLE POMPE E DELLA ESTRUSIONE DI LIQUIDI EDEMA CITOPLASMATICO CON SEGREGAZIONE DEL LIQUIDO (INSIEME APROTEINE PLASMATICHE) IN VACUOLI INGORGO SISTEMA DIGESTIVO DELLA CELLULA Espressione di danno digestivo intracellulare Danno di membrana (alterazioni permeabilit o rottura)ingresso/disponibilit proteine Vacuoli che si fondono con i lisosomi + Patologia da insufficienza di enzimi (ingorgo del sistema lisosomiale) 17. DEGENERAZIONE VACUOLARE DA IPOSSIARallentamento del flusso degli elettroni a livelloIPOSSIA della catena respiratoria mitocondriale Sintesi di ATP NADH / NADAttivit pompe di[ADP,AMP]membrana + FosfofruttochinasiIngresso diioni e acqua [Glicogeno]Glicolisi Edema focale[Ac. Piruvico][Ac. Lattico] pH nel citoplasma corticaleFormazione di vacuoli 18. INGRESSO DI MATERIALE PROTEICO IN QUANTITA SUPERIORE ALLE CAPACITA DIGESTIVE DELLA CELLULAINGRESSO DI MATERIALE NON DIGERIBILE PER LA MANCANZA DI ENZIMI ADATTICARENZA GENETICA ENZIMATICA (INBORN LYSOSOSOMAL DISEASES)SEGREGAZIONE NEI LISOSOMI DI SOSTANZE CHE INIBISCONO LE IDROLASIBLOCCO DELLA FUSIONE FRA LISOSOMI E FAGOSOMI 19. DEGENERAZIONE IDROPICA Alterazioni osmotiche Alterazioni permeabilit H2O (che si raccoglie anche in grossi vacuoli) enzimi cellulari Rigonfiamento cellulare Limitato rigonfiamento mitocondriale (dissociazione fosforilazione ossidativa) Alterazioni lisosomiali enzimi cellulari Lestremizzazione del fenomeno conduce alla degenerazione palloniformeInfiammazione sierosa/stasi/edemiSquilibri osmotici Si riscontra in: IntossicazioniIpocorticosurrenalismoShock 20. LA QUANTITA DI ACQUA CHE ENTRA NELLA CELLULA E SUPERIORE AQUELLA CHE ESCE> P. IDROSTATICA NELL INTERSTIZIO< P.OSMOTICA< CONTENUTO ENERGETICO NELLA CELLULA,CARENZA DI ATP, CATTIVO FUNZIONAMENTODELLE POMPE COMPROMISSIONE DELLE POMPENEL CORSO DI INTOSSICAZIONI 21. Degenerazione idropica delle cellule dello strato basale 22. DEGENERAZIONE PALLONIFORMELESIONI EPIDERMICHE PRECOCI IN CORSO DI INFEZIONI DELLA CUTE. LECELLULE IDROPICHE VANNO RAPIDAMENTE IN NECROSI E PRODUCONOVESCICOLE CARATTERISTICHE (HERPES SIMPLEX, VARICELLA, VAIOLO) 23. DEGENERAZIONE IALINA EPITELIALE Gocciole di aspetto vitreo, amorfo ed omogeneo da accumulo disostanze proteiche (spesso glicoproteiche) Nel fegato: espressione di abnorme assorbimento di proteine e glicoproteineplasmatiche (corpi di Councilman) Alterazioni metabolismo proteico in corso di etilismo (Corpi diMallory) Plasmacellule: Corpi di Russel (accumuli di Ab) 24. Nel rene Eccessiva presenza di Eccessivo riassorbimento a proteine nellultrafiltrato livello del tubulo contorto glomerulare (nefriti econ accumulo intracellulare nefrosi)nei lisosomi delle cellule epiteliali Tumefazione cellulare con riduzione del lume tubulare Nefrosi tubulare a gocce ialine Necrosi e desquamazione cellulare con formazione di cilindri ialini a stampo del tubulo 25. STEATOSI (DEGENERAZIONE GRASSA)PROCESSO PATOLOGICO CARATTERIZZATO DALL AUMENTO (ACCUMULO)MORFOLOGICAMENTE EVIDENTE DI LIPIDI IN CELLULE IN CUI NORMALMENTENON SONO EVIDENZIABILI TRAMITE I COMUNI METODI ISTOLOGICITRIGLICERIDIFOSFOLIPIDISFINGOLIPIDICOLESTEROLOGLICOLIPIDI Le colorazioni elettive per i TG sono:I grassi con le comuni colorazioni - Tetrossido di Osmio: nero(che prevedono passaggi con- Sudan III: arancioalcool e xilolo) vengono asportati - Sudan Nero (o Sudan IV): nero - Solfato di Blu Nilo: rosso 26. LE CELLULE CONTENGONO GOCCE DI LIPIDI PIU O MENO VOLUMINOSESECONDO IL GRADO DI SVILUPPO DEL PROCESSOPIU FREQUENTEMENTE LA STEATOSI E CAUSATA DALLACCUMULO DITRIGLICERIDILE STEATOSI POSSONO COLPIRE TUTTI GLI ORGANIMA CONPARTICOLARE FREQUENZA IL FEGATO PER:- AL RUOLO PARTICOLARE DEL FEGATO NEL CICLO DEI TRIGLICERIDI ENELLA SINTESI DELLE LIPOPROTEINE- ALLE SUE MOLTEPLICI ATTIVITA METABOLICHE E FUNZIONI DIBIOTRASFORMAZIONE- ALLA SUA ESPOSIZIONE AD AGENTI TOSSICI STEATOGENI ENDOGENI EDESOGENI DI PROVENIENZA GASTROINTESTINALE 27. STEATOSICAUSE ESOGENECAUSE GENETICAMENTE DETERMINATE- morbo di Wolman, lisosomiale, manca la lipasi acida fegato- abetalipoproteinemia, no sintesi di apolipoproteine B cellule della mucosa intestinale 28. micelle di colesterolo e fitosterolitrigliceridiPolo apicaleNPC1L1AMTP LCATapoB48 (Lecitina ColesteroloLecitinaEpitelio intestinale Acetil Transferasi) Esterificazione Microsoma Reticolo endoplasmatico chilomicrone GolgiPolo basale Linfatico Chilomicrone nascenteHDLCellule Ac. grassiSangueapoE e apoC2 Lipoproteinlipasi Chilomicrone maturo endoteliale apoC2 colesterolo non est. fosfolipidiapoEHDLLDL-R Chilomicrone secondarioFegatoapoDcolesterolo esterificato 29. plasma + linfa 30. tramite recettore scavengerdei fagociti mononucleati 31. LIGANDINA + PROTEINA 2 32. STEATOSI EPATICADefinizioneAccumulo di lipidi allinterno dellepatocita (> 5%). Pi comunemente sitratta di accumulo di trigliceridi STEATOEPATITEDefinizioneComplicanza necro-infiammatoria di una persistente steatosi epatica. 33. STEATOSI EPATICAMACROVESCICOLARE Un singolo e voluminoso vacuolo di grassodisloca lateralmente il nucleo centraleMICROVESCICOLAREMinute gocce di grasso circondano ilnucleo centrale dellepatocita (in genereper blocco -ossidazione > gravit). 34. STEATOSI EPATICHEAUMENTATO APPORTO- DIETA- MOBILIZZAZIONE DAI DEPOSITIAUMENTATA SINTESI ENDOGENA- DIETA CARENTE DI AC. GRASSI POLIINSATURI- ETANOLODIMINUITO SMALTIMENTO- BLOCCO NELLA SINTESI DEI COSTITUENTIDELLE LIPOPROTEINE- DIFETTO DI MIGRAZIONE 35. STEATOSI EPATICHEAUMENTATO APPORTO- DIETAFegatoac. grassi aVENA PORTAcatena cortaARTERIA EPATICAchilomicroni 36. STEATOSI EPATICHEAUMENTATO APPORTO- DIETA- MOBILIZZAZIONE DAI DEPOSITIT. adiposoCAFFEINA Lipasi inattivaADRENALINADIABETE Lipasi attivaFegato TG ac. grassi 37. MOBILIZZAZIONE ACIDI GRASSICATECOLAMINE TEOFILLINA ACTHCAFFEINA CORTISONE GLUCAGONEAdenilatociclasi FosfodiesterasiATPc AMP 5 AMP (Attivazione)PROTEIN- CHINASI (ATP)LIPASI INATTIVALIPASI ATTIVA TGAG 38. DIABETE E NASHINSULINO-RESISTENZA: Insulina Adipociti IPERINSULINEMIA lipolisi TNF- Rad PC-1X Apporto diac. grassi 1a. Stimolazione della lipogenesi glucidica Leptina Acidi grassi1b. Rilascio di FFA dal tessuto adiposoEpatociti Ac. grassiTNF- Rad Inibizione dellenzima ACC (Ac CoA Carbos.)X Cyt. P-450 4A SvraccaricoPC-1 Cyt. P-450 2E1-ossidazioneLeptinamitocondrialeAcidi grassi malonilCoALipoperossidazioneInsulina Accumulodi ac. grassi FFA nei mitocondri Glicolisi Apo B100 Sintesi di ac. grassiIperinsulinemia-ossidazione 1c. Inibizione della lipogenesiX Accumulo di trigliceridi VLDL 2a. Degradazione della componente ApoB-100 delle VLDL 2b. Mancata secrezione delle VLDL Accumulo epatico degli acidi grassiStimolazione della -ossidazione tramite PPAR-STEATOSI EPATICA 39. I PPARs (peroxisome proliferator-activated receptors) (PPARs) sono un gruppo diproteine recettoriali nucleari che agiscono come fattori di trascrizione e regolanolespressione di geni coinvolti nella proliferazione, il differenziamento ed il metabolismo(carboidrati, lipidi e proteine) 40. Il sovraccarico di acidi grassi stimola iprocessi ossidativi che aumentano lo stressossidativo lipoperossidazioneTEORIA DEL DOPPIO COLPO NELLE NASHDanno mitocondriale -ossidazioneperossisomiale 41. STEATOSI EPATICHEAUMENTATO APPORTO- DIETA- MOBILIZZAZIONE DAI DEPOSITIAUMENTATA SINTESI ENDOGENA- DIETA CARENTE DI AC. GRASSI POLIINSATURIIl fegato non sintetizza gli ac. grassi poliinsaturi (ac. linoleico, linolenico, arachidonico)Due meccanismi principali:1) Gli ac. grassi poliinsaturi hanno azione inibitoria sulla sintesi endogena di ac. grassisaturi STEATOSI2) Nelle membrane si verifica un cambiamento nella composizione dei lipidi danno dimembrana blocco immissione in circolo delle lipoproteine STEATOSI 42. STEATOSI EPATICHEAUMENTATO APPORTO- DIETA- MOBILIZZAZIONE DAI DEPOSITIAUMENTATA SINTESI ENDOGENA- DIETA CARENTE DI AC. GRASSI POLIINSATURI-ETANOLOSTEATOSI ACUTA CONSEGUE ALLINTRODUZIONE DI UNA DOSE ELEVATA (NEL RATTO 6-8 GR/KG DI PESO CORPOREO DI ETANOLO COMPARE DOPO 8-16 ORE DALLINTRODUZIONE E SCOMPARE DOPO CIRCA 36 ORE)STEATOSI CRONICA CONSEGUE ALLINTRODUZIONE RIPETUTA DI QUANTITA ELEVATE DI ALCOL PER LUNGO TEMPO 43. Alcool etilico o etanoloCH3-CH2-OHMolecola organica composta da un singolo gruppo idrossilico (OH) e da unacorta catena alifatica con 2 atomi di carbonio: CH3 CH2 OHLe componenti idrossilica ed etilica conferiscono alla molecola propriet siaidrofile che lipofile: letanolo pertanto un AMFOFILO, propriet importanteper la sua attivit farmacologicaLetanolo si forma naturalmente come prodotto dellossidazione dello zuccheroper fermentazioneLa maggior parte delle bevande alcooliche sono bevande fermentate (vino birra)ed hanno concentrazioni alcoliche fino al 15%Bevande con pi alto contenuto di etanolo sono prodotte per distillazione deiprodotti fermentati 44. STEATOSI DA ETANOLO 45. STEATOSI DA ETANOLOMetabolismo A livello gastrico esistono importanti differenze uomo-donna: nella mucosa gastrica delluomo presente una quantit maggiore di enzima alcol-deidrogenasi. Tale differenza responsabile dei maggiori livelli ematici e della maggioresensibilit della donna agli effetti epatici delletanolo SNP attivitcyt P450Acetil-CoAAc. grassi 46. Etanolo Acetaldeide AcetatoAcetato, proveniente dal catabolismo delletanolo +NADHenzimi catenarespiratoriaSintesi mitocondriale Ossidazione degli acidi grassiproteicaproteine delcitoscheletro radicali liberi >> danno ai mitocondri e ad(tubulina)altri substrati proteici e lipidici (membrane) Sintesi lipoproteine Secrezione di VLDLUlteriore di ACIDI GRASSI ACCUMULO DI TRIGLICERIDI Acetil-CoASistemi navettadiossiacetonfosfato Pool di acidiglicerolo3fosfatograssiSINTESI E POOL gliceroloNADH DI TRIGLICERIDI 47. LESIONE EPATICA CRONICA DA ETANOLOOLTRE ALLA TOSSICITA DELLALCOL ENTRANO IN GIOCO ANCHE ALTRI FATTORIDIETETICI:LETANOLO E MOLTO ENERGETICO (1 GR. PRODUCE 7 CAL.)SODDISFA PARTE DELLE ESIGENZE ENERGETICHE DELLALCOLISTA RIDUZIONE DELLASSUNZIONE DI CIBOCARENZA DI PROTEINE, COLINA, METIONINA, VITAMINE, ACIDI GRASSI POLINSATURIIL FABBISOGNO DI COLINA (per sintetizzare la fostatidilcolina) AUMENTA ANCHE ACAUSA DI UNAUMENTATA DISTRUZIONE DEI FOSFOLIPIDI DI MEMBRANAIL DANNO AL CITOSCHELETRO E ACCENTUATO DALLA COMPARSA DEI CORPI DIMALLORY (citocheratina e proteine contrattili disorganizzate), COSTITUITI DALLASOSTANZA IALINA ALCOLICA 48. NECROSI EPATO-CELLULARESI ACCOMPAGNA ALLA LIBERAZIONE NEL PLASMA DI NUMEROSI ENZIMI:- TRANSAMINASI GLUTAMMICO-OSSALACETICA E GLUTAMMICO-PIRUVICA)- ISOCITRATO-DEIDROGINASI- LATTATO-DEIDROGENASI-GLUTAMILTRANSPEPTIDASIALLA NECROSI SEGUONO PROCESSI FLOGISTICI LOCALIPRENDE ORIGINE LEPATITE ALCOLICAATTRAVERSO EPISODI SUCCESSIVI DI RIGENERAZIONE E NUOVO DANNO ESITA SPESSO IN CIRROSI 49. STEATOSI EPATICHEAUMENTATO APPORTO- DIETA- MOBILIZZAZIONE DAI DEPOSITIAUMENTATA SINTESI ENDOGENA- DIETA CARENTE DI AC. GRASSI POLIINSATURI- ETANOLODIMINUITO SMALTIMENTO- BLOCCO NELLA SINTESI DEI COSTITUENTI DELLE LIPOPROTEINE PROTEICA -Dieta carente di aa (KWASHIORKOR) LIPOPROTEINE-tossine che inibiscono la sintesi proteica LIPIDICA Dieta carente di COLINA, METIONINA, etc 50. TOSSINE E VELENI CHE INIBISCONO LA SINTESI PROTEICA,PROVOCANDO ANCHE STEATOSI-Amanitina: del fungo Amanita Phalloides, inibisce la RNA polimerasi.Esaurite le scorte di apolipoproteine, i trigliceridi cominciano ad accumularsi.- Aflatossine: prodotte dal fungo veleni dellAspergillus flavus che contaminaarachidi e cereali tenuti a temperature ed umidit. Anche responsabile deitumori primitivi al fegato in seguito ad ingestione cronica.- Tossina difterica: prodotta dal corynebacterium difteriae un inibitoredellallungamento della catena proteica (EF2) 51. STEATOSI EPATICHEAUMENTATO APPORTO- DIETA- MOBILIZZAZIONE DAI DEPOSITIAUMENTATA SINTESI ENDOGENA- DIETA CARENTE DI AC. GRASSI POLIINSATURI- ETANOLODIMINUITO SMALTIMENTO- BLOCCO NELLA SINTESI DEI COSTITUENTIDELLE LIPOPROTEINE- DIFETTO DI MIGRAZIONE/SECREZIONESostanze che legano la tubulina interferiscono con il trasporto delle lipoproteineCCl4 : pu inibire la funzione della tubulinaColchicina: inibisce la polimerizzazione della tubulinaVinblastina: blocca i monomeri di tubulina dei microtubuli disaggregazione 52. STEATOSI DA TETRACLORURO DI CARBONIO (CCl4)SOSTANZA USATA COME ANTIELMINTICO E COME SOLVENTE NELLINDUSTRIAPUO AGIRE PER VIA INALATORIA E PER VIA TRANSCUTANEANEL FEGATO PRODUCE:STEATOSI CENTROLOBULARE E NECROSICIRROSICANCRO-CIRROSI 53. MODELLO SPERIMENTALE NEL RATTO SOMMINISTRAZIONE PER VIA ORALE (100/200 mL/100GR DI PESO)ALTERAZIONIPROVOCA UNA STEATOSI GIA EVIDENTE DOPO UNORA DALLA SOMMINISTRAZIONELESIONI ELEMENTARI DEL RETICOLO ENDOPLASMATICO ( FRAMMENTAZIONE DELLECISTERNE, DEGRANULAZIONE..)I MITOCONDRI PRESENTANO LESIONI ULTRASTRUTTURALI, RIGONFIAMENTO,FRAMMENTAZIONE DELLE CRESTE, DISSOCIAZIONE DELLA FOSFORILAZIONEOSSIDATIVABLOCCO DELLE OSSIDAZIONI DEGLI ACIDI GRASSI 54. STEATOSI DA CCl4 Nel reticolo endoplasmatico liscio (SER) CCl4 CCl3* (CLOROMETILE)ClCCl3* + RHCHCl3R* Radicale CCl3* + O2CCl3 O2 * (TRICLOROMETILPEROSSIDO) 55. CLOROMETILE FORMA LEGAMI COVALENTI CONDIVERSE SOSTANZE PRODUCENDO CLOROALCHILAZIONE(LIPIDI, PRTEINE, ACIDI NUCLEICI)LA PEROSSIDAZIONE LIPIDICA PRODUCE:ALTERAZIONE DELLE MEMBRANE SPECIE DEL RETICOLO ENDOPLASMICOFORMAZIONE DI ALDEIDIINTERAZIONE DEI RADICALI LIPIDICI CON PROTEINELIPOFUSCINECEROIDI 56. PRODUZIONE DI ALDEIDI LE ALDEIDI REAGISCONO CON I GRUPPI -SH -NH2INATTIVAZIONE MOLECOLE NOBILIINIBIZIONE SINESI PROTEICA PER DEGRANULAZIONE DEL RERDANNO A DISTANZA (OVVERO IN ALTRI COMPARTIMENTI CELLULARI)PROTEZIONE DA GLUTATIONE RIDOTTO (-SH) ED ALTRI ANTIOSSIDANTI 57. DEGENERAZIONI CONNETTIVALICONNETTIVALI DEGENERAZIONE AMILOIDE DEGENERAZIONE IALINA CONNETTIVALE DEGENERAZIONE FIBRINOIDE DEGENER. MUCOSA CONNETTIVALE 58. AMILOIDOSI ACCUMULO EXTRACELLULARE, A LIVELLO DEL CONNETTIVO DI NUMEROSI ORGANI DI UNA SOSTANZA DI DERIVAZIONE PROTEICA, IDENTIFICATA APPUNTO COMEAMILOIDELA DEPOSIZIONE HA CARATTERE INFILTRATIVO PIU CHE DEGENERATIVO E COMINCIA COME DEPOSIZIONE DI PICCOLI GRANULI CHE POI SI TRASFORMANO IN AMMASSI SEMPRE PIU GRANDI CHE ESERCITANO COMPRESSIONI SULLE STRUTTURE LIMITROFE SIA VASCOLARI CHE PARENCHIMALI FENOMENI COMPRESSIVI CON DISTRUZIONE DEL PARENCHIMA DEGLI ORGANI 59. PATOLOGIA PROGRESSIVA CHE PUO CONDURRE A MORTE GENERALMENTE PER INSUFFICIENZA RENALE PATOLOGIE ASSOCIATE AD AMILOIDOSIMALATTIE INFIAMMATORIE CRONICHE CON FENOMENI DI RIACUTIZZAZIONE(tubercolosi, osteomieliti, AR)TUMORI SOLIDI DI ORGANI NON LINFATICIMALATTIE PROLIFERATIVE NEOPLASTICHE E NON DI PLASMACELLULE E L B(mieloma multiplo, etc)GAMMAPATIE MONOCLONALIPATOLOGIE DEGENERATIVE (Alzheimer, altre)ALTRE MALATTIE EREDITARIE DEL METABOLISMO PROTEICO 60. CARATTERISTICHE TINTORIALIREAZIONE IODO-SOLFORICA (ROSSO/VIOLA)COLORAZIONI ALLA ROSANILINA ( FENOMENO DELLA METACROMASIAAMILOIDE ROSSO, TESSUTO VIOLA)ROSSO CONGO (BIRIFRANGENZA VERDE ALLA LUCE POLARIZZATA, ROSALUCE DIRETTA, PROVA DI BENHOLD, LA PIU SPECIFICA)PAS POSITIVITASI TRATTA DI MATERIALE FIBRILLARE, NON AMORFO COME IN APPARENZAPrescindendo dalla patologia sottostante e dal tessuto, sono comunque:-Fibrille rigide, non ramificate, lunghezza variabile, diametro intorno a 100 -Derivano da assemblaggio longitudinale di protofilamenti-I protofilamenti derivano da apposizione parallela ed antiparallela di catene polipept. (legami H)-I polipeptidi derivano da peptidi diversi (amiloidogenici) ed hanno struttura a foglietti pieghettati -La struttura li rende enzimaticamente inattaccabili prescindendo dalla composizione chimica-La metacromasia e la PAS positivit derivano da una glicoproteina associata (AP) (componente P)-La componente P globulare una pentrassina (precursore ematico SAP) legata tramite il Ca++ 61. Microscopia ottica: depositi omogenei, eosinofilici edamorfi. Microscopiaa luce polarizzata:birifrangenza. 62. Rappresentazione schematica dellequilibrio esistente tra diversi stati conformazionali di una proteina dentro la cellulaCalloni, G. et al. J. Biol. Chem. 2005;280:10607-10613 63. CM Dobson, Protein folding and misfolding, Nature, 426, 884-890 (2003) Nature, 426, 64. Misfolded proteins are normally detected andcleared from cell (or stored in aggresomes)Regolazione del folding proteico nel RE. Molte proteine neosintetizzate sono traslocate nel RE, dove si ripieganonelle loro strutture tridimensionali aiutate da una serie di chaperons . Le proteine ripiegate correttamente sono poitrasportate al complesso del Golgi e poi inviate nellambiente extracellulare. Tuttavia, le proteine malripiegate sonoindividuate da un meccanismo di controllo della qualit e inviate verso un altro pathway (UPR) nel quale essesono ubiquitinate e poi degradate nel citoplasma dai proteasomi CM Dobson, Protein folding and misfolding, Nature, 426, 884-890 (2003)Nature, 426, 65. Signal transduction events associated with ER stress. Chaperone Grp78 binds the N-termini of Ire1, PERK, and ATF6, preventing theiractivation.Unfolded proteins in the ER cause Grp78 to release Ire1, PERK, and ATF6. Upon Grp78 release, Ire1 and PERK oligomerize in ERmembranes.Oligomerized Ire1 binds TRAF2, signaling downstream kinases that activate NF-B and c-Jun (AP-1), causing expression ofgenes associated with host defense (alarm). The intrinsic ribonuclease activity of Ire1 also results in production of XBP-1, a transcriptionfactor that induces expression of genes involved in restoring protein folding or degrading unfolded proteins. Oligomerization of PERKactivates its intrinsic kinase activity, resulting in phosphorylation of eIF2 and suppression of mRNA translation. Under these conditions,only selected mRNAs, including ATF4, are translated. ATF4 induces expression of genes involved in restoring ER homeostasis. Release ofGrp78 from ATF6 allows this protein to translocate to the Golgi apparatus for proteolytic processing to release active ATF6, which controlsexpression of UNFOLDED PROTEIN RESPONSE genes. 66. Patologia molecolare delle proteineDeficit nel ripiegamento conformazionale :alterazioni del trasporto intracellulare e di proteine critichees: deficit di alfa1-antitripsina, fibrosi cistica, ipercolesterolemiafamiliarele proteine non ripiegate o malripiegate inducono uno stress sulreticolo endoplasmatico (UPR): dapprima risposta citoprotettiva,poi attivazione apoptosi (caspasi 12)ruolo in alcune m. neurodegenerative, diabete tipo II ecc.Aggregazione di proteine anomale: alcune forme di amiloidosi,(depositi intracellulari ed extracellulari) 67. Robbins 68. Tornando alle amiloidosi, dunque, parliamo di -fibrillosi CLASSIFICAZIONE (da rivedere)PRIMARIE (ad es. forme eredofamiliari) SISTEMICHE REATTIVESECONDARIE IMMUNOCITICHEAMILOIDOSI AlzheimerInvecchiamento Encefalopatia prionica Cardiopatia senile da TTR normale Disordini metabolici LOCALIZZATETumori ghiandole endocrine (Precalcitonina) (Amilina pancreatica) (Peptide natriuretico)AMILOIDOSI SPERIMENTALI 69. -fibrillosi : ORGANI MAGGIORMENTE COLPITIMILZA(MILZA A SAGU, MILZA A PROSCIUTTO)FEGATORENECUOREMILZA -AL TAGLIO SONO EVIDENTI ZONE BIANCASTRE ROTONDEGGIANTI,IMMERSE NELLA POLPA ROSSA LINFILTRAZIONE INIZIA INTORNO ALLE ARTERIOLE FOLLICOLARI E SIESTENDE POI A TUTTO IL FOLLICOLORENE LAMILOIDE SI DEPOSITA INIZIALMENTE NEI GLOMERULI: E LA ZONACORTICALE QUINDI A PRESENTARE LE MACCHIE BIANCASTREFEGATO LAMILOIDE INIZIA A DEPOSITARSI IN CORRISPONDENZA DEGLI SPAZIDI DISSE, NELLA ZONA MEDIANA DEL LOBULOCUORE LAMILOIDE INIZIA A DEPOSITARSI INTORNO ALLE ARTERIOLE DELPARENCHIMACERVELLO DEPOSITI DI AMILOIDE SI TROVANO NELLE PLACCHE SENILI ODRUSE (ABBONDANTI NEGLI ANZIANI) 70. (transtiretina mutata) (proteina carrier) amiloidogenica dopoclivaggio nei fagociti (Sistemiche)Dal volume: Pontieri Patologia Generale Piccin Nuova Libraria S.p.A. 71. -fibrillosi reattive (fibrille AA)Mutazione su pirina/marnostrina(forme amiloidosiche eredofamiliari non-neuropatiche)AEF= fattore potenziante amiloide (forme fibrillari precoci di AA)autonucleazioneapoSAA legata con HDL (caratteristiche apo dopo denaturazione)Ruolo delle metalloproteasisi complessano con amiloideRuolo del clivaggio 72. -fibrillosi immunocitiche (fibrille AL) alcune catene leggere sono pi amiloidogeniche di altre (>)in genere le catene pi grandi e glicosilate, dopo clivaggio, polimerizzano Ruolo del clivaggio 73. -fibrillosi degli emodializzati (fibrille AH)insufficienza renaleemodialisi 2-microglobulina (12kD) nel sangue Amiloidosi (7-10 anni)Tunnel carpaleCisti ossee Progressivo2-microglobulina 2-microglobulinanel sangue (fattori favorenti sangue la concentrazione locale, come elemento critico) 74. Concentrazionenel microambiente(la sede di depositodipende dalla funzionefisiologicaedallemutazioni)Complessazionecon costituentidella matrice 75. -fibrillosi localizzate: Malattia di Alzheimer familiare (alterazioni simili anche nella S. di Down)Anatomia patologica:-Placche amiloidi-Grovigli neurofibrillariEsordio precoce (40-45 anni) o pi spesso tardivo (> 65 anni) exitus in 5-10 anniMutazioni:-APP (proteina precursore amiloide- integrale di membrana adesione, canali): nei siti di clivaggio proteasico inibizione - secretasiA4 formazione -fibrille-Presenilina-1 (PS-1) favorisce lalterazione del clivaggio di APPA4-Presenilina-2 (PS-2) favorisce lalterazione del clivaggio di APP e innesco apoptosi-ApolipoproteinaE (tre varianti alleliche ApoE2, E3, E4): ApoE4 50-60% forme tardive iperfosforilazione Tau funge da chaperonina per A4facilitazione formazione -fibrille--1 antichimotripsina e 2-Macroglubulina 76. effetto neurotossico potenziato dai ROS 77. Sviluppo dei Gomitoli Neurofibrillari (GN)La proteina Tau iperfosforilata neuroneinibisce lassemblaggio deimicrotubuli e si autoassemblain doppi filamenti elicoidaliallinterno dei neuroniproteinatauanomala La proteina tau e i(nondoppi filamentimicrotubulimutata) elicoidalipromuovono anchela formazione diplacche neuritiche Laccumulo di I doppi GN fosfati nella filamenti proteina tauelicoidali siIl conduce allaaccumulano neurone formazione di nel neurone eva producono i doppi filamenti elicoidaliGNincontroa morte ! 78. -fibrillosi localizzate: Malattie prionichePrione : prion (acronimo di "PRoteinaceus Infective ONly particle"=particella infettivasolamente proteica) "agente infettivo non convenzionale" di natura proteica,apparentemente privo di acidi nucleici in quanto resistente a trattamenti in grado didegradarli ma sensibile alle proteasi.sono estremamente resistenti :una cottura a 360 C per oltre unora (abbastanza per sciogliere il piombo)Radiazioniformaldeide, varechina diluita e acqua bollenterisultano sensibili ai seguenti trattamenti:NaOCl 2% per 1hNaOH 2M + autoclave a 121C per 30 min.formalina 98% per 1hI prioni sono attualmente considerati gli agenti delle encefalopatie spongiformitrasmissibili (TSE) delluomo e degli animali :UOMO:Malattia di Creutzfeldt-Jakob (MCJ, o CJD)nuova variante di MCJ (nvMCJ)malattia di Gertsmann-Straussler-Scheinker (MGSS)kuruinsonnia familiare fatale (IFF) 79. PRIONIGlicoproteina di 254aa, funzione non ben definita, lega il rame, espressa sulla superficiedi varie cellule, soprattutto neuroniForme delle proteine prioniche:1) PrPres=proteina prionica resistente alle proteasi (perde solo 6-8-kD al N-term) oPrPsc=proteina della scrapie2) PrPsen=proteina sensibile alle proteasi o PrPc=proteina cellulareSecondo il modello pi accreditato la PrPc diviene patogena in seguito a un mutamentoconformazionale indotto da:1)un "prione infettante"2)una mutazione genetica spontanea, trasformandosi in PrPres che agisce su altre PrPccon una reazione a catenaLe PrPres perdono la loro funzione e tendono ad accumularsi nella sostanza grigiaformando le placche amiloidiLa PrPsc differirebbe dalla proteina naturale per la conformazione tridimensionale conacquisizione di conformazione a foglietti beta 80. Malattia prionica: Trasmissione conformazionale Infezione + replicazione 81. DEGENERAZIONE IALINA CONNETTIVALEACCUMULO NEL CONNETTIVO DI MATERIALI DI VARIA NATURA CON ASPETTOTRASLUCIDO, VITREO, OMOGENEOI CONNETTIVI COLPITI DA IALINOSI APPAIONO OMOGENEI E NON HANNOSTRUTTURA FIBRILLARE, MA GRANULARELA IALINOSI, A DIFFERENZA DELLAMILOIDOSI, CHE COMINCIA SEMPRE DAIVASI, PUO TROVARSI ANCHE LONTANO DA QUESTI NATURA ETEROGENEA DELLE SOSTANZA IALINA: MATERIALE GLICOPROTEICOFIBRINA, ALBUMINA, FRAMMENTI DI CELLULE,PROTEINE PLASMATICHECARATTERISTICHE TINTORIALIAFFINITA PER LEOSINAAFFINITA PER LA FUCSINACOLORATA IN ROSSO CON IL VAN GIESON 82. DEGENERAZIONE IALINA CONNETTIVALEE FREQUENTE IN AMBITO PATOLOGICO: NEI TESSUTI CICATRIZIALI NEI PROCESSI INFIAMAMTORI CRONICI (ANCHE AR) NELLO STROMA DI ALCUNE FORME DI TUMORI (FIBROMI) NEI PROCESSI ARTERIOSCLEROTICI NELLA GLOMERULONEFRITE CRONICAFISIOLOGICA:PROCESSI REGRESSIVI DELLA PARETE DEI VASI DELLUTERO DOPO LAGRAVIDANZANEL CONNETTIVO CHE SOSTITUISCE I CORPI LUTEI SIA GRAVIDICI CHEMESTRUALINEL CONNETTIVO PERIODONTALE 83. DEGENERAZIONE IALINA CONNETTIVALELA SOSTANZA IALINA E DI NATURA GLICOPROTEICA 70% sostanze affini al collageno30% proteine plasmaticheLA MASSA PRINCIPALE DELLE PROTEINE (FINO AL 70%) E COSTITUITA DAMATERIALE AFFINE AL COLLAGENO)IL RESTO E FORMATO DA PROTEINE DI ORIGINE PLASMATICALA PATOGENESI NON E ANCORA BEN CHIARITA:SEMBRA CHE LA SOSTANZA IALINA DERIVI DALLA PRECIPITAZIONE IN UNCONNETTIVO ALTERATO DI PROTEINE DEL SANGUE FILTRATEATTRAVERSO VASI LESI 84. DEGENERAZIONE IALINA CONNETTIVALE PATOGENESIPRECIPITAZIONE DI PROTEINEPLASMATICHE FILTRATEATTRAVERSO LESIONIENDOTELIALI IN UN CONNETTIVOALTERATO INFILTRAZIONE PRODUZIONE LOCALE, A LIVELLO DEL CONNETTIVO DA PARTE DEL RE O ALTERAZIONE DEL CONNETTIVOPRESENZA DI C3B LEGATO ADAC. IALURONICO (ATTIVAZIONEC TRAMITELA VIAALTERNATIVA, ASEGUITODELLA COMPLESSAZIONE CONAC. IALURONICO AUTOAg?) 85. DEGENERAZIONE IALINA CONNETTIVALESEDE PIU COLPITA : VASALE ARTERIOSASOTTOENDOTELIALE CON RIDUZIONE DEL LUMEMA CONSERVAZIONE DELLINTIMA E DELLE FIBRE MUSCOLARIMILZA RENE CERVELLOLA DEPOSIZIONE DELLA IALINA E INVOCATOCOME MOMENTO INIZIALE DELLARTERIOSCLEROSI 86. DEGENERAZIONE IALINA CONNETTIVALENEI GLOMERULI (IN CORSO DI ARTERIOSCLEROSI O DI GLOMERULONEFRITE) LA IALINOSI COMINCIA IN CORRISPONDENZA DELLE MEMBRANE BASALI DELLENDOTELIO DEI VASI CAPILLARI SI ESTENDE POI ALLA PARETE DEI PICCOLI VASI E AGLI SPAZI CONNETTIVALI I DUE FOGLIETTI DELLA CAPSULA DI BOWMAN TENDONO A SALDARSI (SEMILUNE CARATTERISTICHE DELLA GN SUBACUTA)PRIMA IN UNA PARTE LIMITATA POI COMPLETAMENTEOBLITERAZIONE DELLO SPAZIO CAPSULARE- ATROFIA CELLULARE- I GLOMERULI SI TRASFORMANO IN MASSERELLE COMPATTE E OMOGENEE POI VANNOINCONTRO A FIBROSI 87. DEGENERAZIONE IALINA CONNETTIVALEGLOMERULO NORMALE GLOMERULO CON IALINOSI MEDIA 88. DEGENERAZIONE (NECROSI) FIBRINOIDE COMPARSA DI MATERIALE OMOGENEO, ALTAMENTE RIFRANGENTE, EOSINOFILO SOTTOFORMA DI FASCI CHE PRESENTA COMPOSIZIONE VARIABILE DEGERAZIONE IRREVERSIBILE DELLA SOSTANZA FONDAMENTALE DEL CONNETTIVO CHE SI FRASFORMA IN UN FINE RETICOLO DI MATERIALE EOSINOFILOCARATTERISTICHE TINTORIALIEOSINOFILIAPAS POSITIVITACOLORAZIONE ROSSO BRILLANTE CON IL METODO DIMALLORY 89. DEGENERAZIONE (NECROSI) FIBRINOIDE - processi infiammatori cronici - nel granuloma reumatico SI RITROVA IN: - nelle lesioni tissutali di varie malattie autoimmuni (LES, PN, AR) - nello stroma di tessuti neoplastici - nellulcera peptica - nelle lesioni difteriche Costituzione della sostanza fibrinoide Precipitazione di componenti della sostanza fondamentale *da parte di proteine basiche* derivanti da: - istoni di cellule necrotiche - granuli dei neutrofili in corso di processi flogistici - prodotti di degradazione della fibrina 90. DEGENERAZIONE (NECROSI) FIBRINOIDEORIGINE DEL MATRIALENATURA TISSUTALE: NUCLEOPROTEINE NEL LUPUSNATURA EMATICA : GAMMA-GLOBULINEFIBRE COLLAGENE : LE FIRILLE PERDONO LA LORO CARATTERISTICAPERIODICITA , SI RIGONFIANO E SI TRASFORMANO IN UN AMMASSOOMOGENEOTRASFORMAZIONE DOVUTA AD INTERAZIONE DELLE FIBRECOLLAGENE CON MATERIALE DI NATURA TISSUTALE OEMATICAA DIFFERENZA DELLA IALINA LA FIBRINOIDE PORTA A DISTRUZIONE DELLA MEDIA, INTIMA ED AVVENTIZIA 91. DEGENERAZIONE (NECROSI) FIBRINOIDE 92. DEGENERAZIONE MUCOSA Accumulo di mucopolisaccaridi (soprattutto ac. ialuronico)nel connettivo In corso di molti processi patologici Atrofia gelatinosa del tessuto adiposo (grasso subepicardico,midollo osseo e sottocutaneo in corso di gravi dimagramenti) persostituzione trigliceridi con mucopolisaccaridi Neoplasie: polipi e papillomi, mixomi(tumore mucoide) parotide cisti mucose tendinee e sinoviali (anche nei fluidi con limiti funzionali) mixedema (ipotiroidismo TSH ac. Ialuronico e condroitinsolfato) (anche in corso di ipertiroidismo per aumento attivit metabolica connettivale) muscoli e miocardio 93. MORTE CELLULAREFENOMENO complesso, caratterizzato da una SEQUENZA di EVENTI BIOCHIMICIe MORFOLOGICISI RISCONTRA IN CIRCOSTANZE MOLTO DIVERSE: REAZIONI DIFENSIVE- citotossicit dei LT e NK DANNO TISSUTALE DA PERDITE CELLULARI CONSEGUENTI allAZIONE diFATTORI LESIVI ESOGENI ED ENDOGENI PROCESSO che si verifica nel normale SVILUPPO e CICLO VITALE DEI TESSUTI- rimodellamenti morfogenetici- processi ontogenetici- involuzioni tissutali- rinnovamento di cellule a rapido ricambio- controllo della risposta infiammatoria e immunitariaLA MORTE CELLULARE E UN PROCESSO IRREVERSIBILE CHE EVOLVESECONDO DUE MODALITA BEN DEFINITE che hanno un diverso significato MORTE CELLULARE PROGRAMMATA o APOPTOSI NECROSI 94. NECROSIESPRESSIONE MORFOLOGICA della MORTE CELLULARE da DANNOIRREVERSIBILE, in gran parte conseguente alla DEGRADAZIONE ENZIMATICAdelle strutture cellulari e della DENATURAZIONE delle PROTEINECAUSE: sono distribuite in tutti i gruppi di classificazione eziologicaASPETTI MORFOLOGICI CELLULARICITOPLASMA - ASPETTO OMOGENEO, EOSINOFILIA- LISI degli organuli citoplasmatici (RER, REL,lisosomi)- ASPETTO VACUOLIZZATO (vacuoli digestivi) - AUTOFAGIA- FIGURE MIELINICHE- DEPOSITI DI SALI DI CALCIO nelle cellule morteNUCLEO: dopo un addensamento reversibile della cromatina che formaaggregati a tessitura fine ai margini del nucleo, col progredire dellirreversibit deldanno si ha:- PICNOSI (diminuzione di volume)- SCOMPARSA DEL NUCLEO- CARIOLISI (dissolvimento)- CARIORESSI (frammentazione) 95. MECCANISMI MOLECOLARI DELLA NECROSI1) BLOCCO della SINTESI DI ATP2) LA LESIONE delle MEMBRANE CELLULARI e degli ORGANULI e le loroalterazioni FUNZIONALI sono CRITICHE per LIRREVERSIBILITA del danno4) IL CALCIO E UN IMPORTANTE MEDIATORE delle MODIFICAZIONIBIOCHIMICHE che PORTANO alla MORTE CELLULARE3) IRREVERSIBILITA del DANNO MITOCONDRIALE5) ATTIVAZIONE di PROTEASI (calpaine), FOSFOLIPASI, ENDONUCLEASI6) MODERATI O FORTI SPOSTAMENTI del pH CELLULARE (autolisi,denaturazione proteica)7) UN RUOLO FONDAMENTALE E SVOLTO dalla LIBERAZIONE di RADICALILIBERI DELLOSSIGENO8) ALTERAZIONI e BLOCCHI a LIVELLO TRASCRIZIONALE e TRADUZIONALESONO SPESSO INCOMPATIBILI con la VITA CELLULARE 96. TIPI di NECROSINECROSI COAGULATIVAPRECOCE DENATURAZIONE delle PROTEINE e loro COAGULAZIONE(DENATURAZIONE ENZIMI BLOCCO della PROTEOLISI)Istologia- Masserelle eosinofile , senza nucleo, architettura del tessuto conservata- Detriti cellulari fagocitate da macrofagi infiammatoriEziologia- Ischemia, agenti tossici, stimoli fisici (ustioni), agenti battericiNECROSI COLLIQUATIVAAttivazione di ENZIMI LITICI con DISSOLUZIONE ENZIMATICA (colliquazione)della cellula)- autolisi (da enzimi lisosomiali)- eterolisi (da enzimi provenienti dallesterno: neutrofili)Istologia:Rammolimento e liquefazione del tessuto con perdita dei contorni cellulari edellarchitettura tissutaleEziologia:- Ischemia cerebrale (autolisi diretta)- Batteri piogeni (eterolisi) Infiammazione purulenta (SUPPURAZIONE da batteripiogeni) (ASCESSO e EMPIEMA) 97. NECROSI CASEOSATIPICA AL CENTRO DI GRANULOMI dovuta a FENOMENI DI IPERSENSIBILTACELLULO-MEDIATAPu evolvere in:- Persistenza e incapsulamento fibroso- Colliquazione e confluenza- Calcificazione- CicatrizzazioneSTEATONECROSI: necrosi del tessuto adiposoEziologia- Necrosi acuta pancreatica- Traumi (tessuto adiposo sottocutaneo mammella e vagina post partum)NECROSI GANGRENOSAalterazione ed estensione del tessuto necrotico dovuta a:1) contaminazione batterica (Clostridi) GANGRENA UMIDA da contaminazione dal suolo o penetrati in seguito a traumi (Cl. prefringes, septicum, hystoliticum) GANGRENA GASSOSA Malattie sostenute da clostridi: - Carbonchio sintomatico (Cl. chauvoei) - Edema maligno (Cl.septicum,perfrimges,novyi)2) rapida evaporazione 98. NECROSI COAGULATIVAINFARTO DEL RENEINFARTO DEL MIOCARDIO 99. NECROSI CASEOSATUBERCOLOMA POLMONARE 100. NECROSI COLLIQUATIVACERVELLOPOLMONE 101. APOPTOSIVIA DI MORTE INDOTTA IN OGNI CELLULA SINGOLARMENTE DA UNPROGRAMMA INTRACELLULARE FINEMENTE REGOLATO CHE CONDUCE ALLADEGRADAZIONE DEL DNA E DELLE PROTEINE, PUR CONSERVANDO UNAMEMBRANA CITOPLASMATICA INTEGRA, MA MODIFICATA, AFFINCHE INDUCALA FAGOCITOSILA PERSISTENZA DELLA COMPARTIMENTALIZZAZIONE NON INDUCE REAZIONEFLOGISTICA COME ACCADE NELLA NECROSITALORA COESISTE CON LA NECROSI CONDIVIDENDONE ALCUNI MECCANISMI 102. APOPTOSI IN FISIOLOGIAo una forma di suicidio altruista: spesso la cellula si sacrifica per il bene dellinteroorganismooLe modalit della morte sono finalizzate a evitare linstaurarsi di fenomeni diINFIAMMAZIONE e di AUTOIMMUNIToIl fatto che non dia luogo a fenomeni di infiammazione fa s che la morte cellulare nonsia avvertita dallorganismo (morte indolore)-SVILUPPO EMBRIONALE/FETALE E METAMORFOSI-INVOLUZIONE ORMONO-DIPENDENTE (MAMMELLA, ENDOMETRIO, ETC.)-NORMALE TURN-OVER TISSUTALEMANTENIMENTO OMEOSTASI-ONTOGENESI E OMEOSTASI DEL SISTEMA IMMUNITARIO-RISPOSTE IMMUNITARIE-PERDITA DEL CONTATTO CELLULA-CELLULA E CELLULA-STROMA 103. APOPTOSI IN PATOLOGIAoPerdita cellulare in condizioni patologiche-STIMOLI DANNOSI (RADIAZIONI, TOSSICI, IPOSSIA LIEVE, UPR, ETC.)-VIRUS-PARENCHIMI DOPO OSTRUZIONE DI DOTTI ESCRETORI-PROGRESSIONE NEOPLASTICA-ALTERAZIONI MITOCONDRIALI RILEVANTI (INSIEME ALLA NECROSI)-ATROFIA ORMONE-DIPENDENTE-DEPRIVAZIONE DEI FATTORI DI CRESCITA-NEURODEGENERAZIONI 104. MORFOLOGIA DELL APOPTOSI 105. MORFOLOGIADELL APOPTOSINECROSIAPOPTOSINECROSIAPOPTOSIMEMBRANA MEMBRANANUCLEARE NUCLEARENORMALEAPOPTOTICA(PORI(ADDENSAMENTODISTRIBUITI) PORI) 106. BIOCHIMICA ED EVIDENZIAZIONEDELL APOPTOSIsi ione proteaAttivaz APOPTOSIDig e stion e DN A ignalsEs EAT-M 107. MECCANISMI DELL APOPTOSI 108. MECCANISMI DELL APOPTOSI: VIA ESTRINSECA-RECETTORIALEezionpr oteMORTE FLIPMORTEVITA 109. Apoptosi vs. proliferazione: alcuni esempi 110. MECCANISMI DELL APOPTOSI: VIA INTRINSECA-MITOCONDRIALEmancanzagrowth factors Le vie intrinseca ed estrinseca possono embricarsi 111. MECCANISMI DELL APOPTOSI: VIA INTRINSECA-MITOCONDRIALE 112. Anti-apoptotic proteins Pro-apoptotic proteins Bad Bax BidBcl-2 BakBcl-XL BikMcl-1 BimBcl-w Bmf BokPuma 113. MECCANISMI DELL APOPTOSI: FASE EFFETTRICECISTEIN PROTEASI SU RESIDUI DI AC. ASPARTICO: CASPASI CADpoly (ADP-ribose)polymerase family 114. CARATTERISTICHE PRINCIPALI DEIGENI DELLAPOPTOSISONO CONSERVATI NEL CORSO DELLEVOLZIONERISPONDONO A PI STIMOLIAPPARTENGONO A UNA DELLE SEGUENTI CATEGORIE:1. recettori di membrana (Fas/APO1/CD95, TNF, TRIAL)2. adattatori (FADD, APAF-1, ced-4)3. modulatori (anti-apoptotici, come Bcl-2 e ced-9, pro- apototici come Bax e egl-1)4. effettori (caspasi, endonucleasi, ced-3)5. inibitori (CrmA, cFLIP, survivin)6. induttori (p53, c-myc, reaper)7. della fagocitosi (flippasi) 115. INIBITORI DELLAPOPTOSI Possono essere di origine virale (CrmA) Possono essere presenti naturalmente (c-FLIP)o essere indotti in cellule tumorali. Spesso sitratta di molecole esca: possiedono undominio, es. DD, ma mancano dellaltro, es.DED e quindi competono con gli adattatoricompleti. Altri inibitori (IAP, survivin) si legano allecaspasi, impedendone lattivazione; sono a lorovolta inattivati da un fattore di originemitocondriale (Smac/DIABLO) 116. INDUTTORI DELLAPOPTOSI Alcuniinduttori si attivano in base ad unorologio interno (es. reaper di Drosophila) Altri si attivano quando la cellula percepisce unoscompenso tra segnali di proliferazione emomento in cui tali segnali vengono inviati (es.myc) Altri ancora quando la cellula non riesce acompiere correttamente le tappe del ciclocellulare a causa di danni al DNA (es. p53) Agiscono determinando uno sbilanciamento tramodulatori anti- e pro-apototici a favore deisecondi. 117. Modificazioni della superficie cellulare:esposizione della fosfatidilserina 118. Molecole di superficie coinvolte nelriconoscimento delle cellule apoptotiche da parte dei macrofagi 119. multivalenza dei mitocondri 120. Omeostasi cellulare e apoptosiLomeostasi cellulare frutto di un sottile equilibrio, finemente regolato, tra proliferazione e morte cellulareMOLTIPLICAZIONENUMERO (MASSA) CELLULAREMORTE(MITOSI)(APOPTOSI)se in eccessose in eccessoCANCRO/TUMORIDEGENERAZIONE/APLASIA se in difetto se in difettoMolte cellule sembrano contenere nel genoma un programma di suicidio, la cui soppressione indispensabile per la continua sopravvivenzaLa soppressione del programma di suicidio si attua attraverso fattori e segnali esterni (fattori di sopravvivenza, attacco al substrato, ecc.) che determinano un controllo sociale delle cellule 121. SINTESI DEI MECCANISMI DI INDUZIONE DELLAPOPTOSI 122. MECCANISMI ADATTATIVI 123. FUNZIONI SVOLTE DALLE PROTEINE DELLO STRESS oHeat shock proteins 124. Marcatura, da parte della ubiquitina, di catabolismoproteineLegame con gli istoni riparazione DNA Degradazione delle ciclinecontrollo ciclo cellulareModulazione recettori di membranaSvolgimento e riavvolgimento proteine mitocondrialiTrasporto proteine nei vari compartimenti cellulariAssemblaggio proteine citoscheletricheRinaturazione di proteine denaturate Induzione di termotolleranzaAssemblaggio IgInattivazione recettori per ormoni tiroidei 125. Possibili meccanismi cellulari di adattamento al dannoSintesi di proteine dello stress Modificazioni del volume delle cellule(IPERTROFIA IPOTROFIA)Modificazioni del numero delle cellule(IPERPLASIA INVOLUZIONE)Modificazioni del differenziamento (METAPLASIA) 126. ADATTAMENTO CELLULARE: ACCRESCIMENTOLACCRESCIMENTO DI UN ORGANO AVVIENESECONDO MODALITA E LEGGI COSTANTI.LE DIMENSIONI RAGGIUNTE DIPENDONO DALLA ETA E DALLA SPECIE BIOLOGICA DI APPARTENENZA 127. IPERTROFROFIEPSEUDOIPERFROFIEIPERTROFIEI. VERA IPERPLASIA 128. Lappartenenza delle cellule ai tre tipi principali di tessuti (a cellulelabili, stabili e perenni)comporta una diversa regolazione a livello del ciclo cellulare.COWDEY:VegetativeIntermitoticheDifferenziateReversibiliPostmitoticheFisse 129. LE CELLULE SONO CONTINUAMENTEESPOSTE A DIVERSI TIPI DI SEGNALICHIMICI CHE NE DETERMINANOLATTIVITA SIA DAL PUNTO DI VISTAMETABOLICO CHE PROLIFERATIVO. 130. G. MAMMARIE FISIOLOGICHE UTEROMUSCOLI SCHELETRICICUOREIPERTROFIECUORE PATOLOGICHEVICARIANTICONGENITE 131. CAUSE DI IPERTROFIAFATTORI ORMONALIFATTORI CONGENITIAUMENTATA SOLLECITAZIONEFUNZIONALE 132. IPERTROFIE CONGENITEGIGANTISMOIPERPLASIE CONGENITEMACROSOMIA FETALEI. LANGHRERANSIPERPLASIE COMPENSATORIETIROIDESURRENALIIPERTROFIE DI ORGANI CAVIINTESTINO 133. IPERTROFIE DA AUMENTATA SOLLECITAZIONE FUNZIONALE O DA LAVOROIPERTROFIA MUSCOLARE NEGLI ATLETIMIOSINA LENTA SLOW SITUATE IN PROFONDITATIPICHE DELLA POSTURAAUMENTANO NEGLI SPORTSISOMETRICI O AEROBICIFIBREC. KREBSMIOSINA VELOCE FAST ATP ATTRAVERSO GLICOLISIANAEROBIASITUATE IN SUPERFICIEIPERTROFIA NEGLI SPORTSISOTONICI O ANAEROBICI 134. IPERTROFIA DEL MIOCARDIOFISIOLOGICAPATOLOGICAGENERALMENTE COLPISCE I VENTRICOLISOVRACCARICO DIPRESSIONEVENTRICOLARESINISTRA SOVRACCARICO DI VOLUME 135. SOVRACCARICO DI PRESSIONE : AUMENTA LAFORZA CHE DEVONO VINCERE LE CELLULE DELMIOCARDIO DURANTE LACCORCIAMENTOSISTOLICOS.P. = PR/2hFISIOLOGICA ATLETIIVSIPERTENSIONEPATOLOGICAETAOBESITA 136. IVS NEGLI ATLETI SOVRACCARICOVOLUME : IL PRECARICOSPORTS ISOTONICI PER AUMENTO DELLA GITTATASISTOLICA E DELLA PORTATA DUPLICAZIONE IN SERIE DEISARCOMERI CON ALLUNGAMENTODELLE FIBRE E DILATAZIONE DELLACAVITA VENTICOLAREIPERTROFIA ECCENTRICA 137. IVS NEGLI ATLETI SOVRACCARICOPRESSIONE : IL POSTCARICO AFTERLOAD SPORTS ISOMETRICI AUMENTODELLE RESISTENZE PERIFERICHE CON SOVRACCARICO DI PRESSIONE DUPLICAZIONE IN PARALLELO DELLE MIOFIBRILLE CON ISPESSIMENTO DELLAPARETE. LA CAVITA RIMANE NORMALEIPERTROFIA CONCENTRICA 138. CAUSE PATOLOGICHE DI IPERTROFIA CARDIACA-Ipertensione-Obesit-Difetti valvolari (stenosi, insufficienze)-Malattie congenite-Cardiomiopatie ipertrofiche ed ipertrofico-dilatativeLIMITI DELLUTILITA FUNZIONALE DELLE IPERTROFIESuperficie r2Volume r3 139. CARDIOMIOPATIE IPERTROFICO-DILATATIVE 140. IPERTROFIA DA LAVORO DEL CUORE E REVERSIBILE SE RIMOSSA LA CAUSA : IL VOLUMERITORNA LENTAMENTE ALLA NORMA E UNA IPERTROFIA VERA FIBRA MUSCOLATRE AUMENTA DI CIRCA 3 VOLTEIL NUCLEO AUMENTA MOLTISSIMOIL LETTO CAPILLARE NON AUMENTA IN PROPORZIONESQUILIBRIO FRA RETE CAPILLARE E PARENCHIMADA NUTRIRE 141. LA FIBRA IPERTROFICA E MALNUTRITAE IN GRADO DI SVOLGERE LE SUE FUNZIONI IN FASE DI RIPOSO, MA RESISTE MENO DURANTE GLI SFORZILIPERESPRESSIONE PROTEICA CHE CONDUCEAD IPERTROFIA PRODUCE PROTEINE NON DEL TUTTO NORMALI CHE HANNO FUNZIONALITARIDOTTA NEL MECCANISMO DI CONTRAZIONE NELLIPERTROFIA CARDIACA SI VERIFICA UNAUMENTO PROGRESSIVO DEI FENOMENI APOPTOTICI: PERIDITA DEGLI ELEMENTI CONTRATTILISI PRODUCE ANCHE UNALTERAZIONE DEI POTENZIALIDI MEMBRANA : AUMENTA LINCIDENZA DELLE ARITMIE 142. I SEGNI DELLANOSSIA E DELLA MALNUTRIZIONECOMPAIONO IN FORMA DI INSUFFICIENZA CARDIACANEL TEMPO SI MANIFESTANO PROCESSI REGRESSIVI FINO ALLA NECROSI: IL TESSUTO MORTO ESOSTITUITO DA T. FIBROSO, QUINDI IL CUOREIPERTROFICO APPARE COME CUORE FIBROTICO 143. IPERTROFIE COMPENSATORIEDA STIMOLI MECCANICI DA LAVORO CHIMICOI. COMPENSATORIAO VICARIANTE ORGANI A MUSCOLATURALISCIA DOVE UN AUMENTODEL LAVORO CONTRATTILE ORGANI PARI IN PORTA AD UN AUMENTO DEL SEGUITO ALLA V. DELLE FIBRE ASPORTAZIONE DIUNO DI ESSIESOFAGOINTESTINO RENE VESCICA MIDOLLO EMOPIETICO FEGATO 144. IPERTROFIE DA CAUSE ORMONALI GHIANDOLE :ORGANI : TIROIDEACROMEGALIACORTECCIA SURRENALEUTEROIPOFISI G. MAMMARIE 145. EZIOPATOGENESI E REVERSIBILITA DELLE IPERTROFIE ADATTAMENTO ANATOMICO E FUNZIONALE AD UNO STIMOLO CHE PERMANE FINO AL PERMANERE DELLO STIMOLO STESSOAUMENTO PROCESSI OSSIDATIVIAUMENTO ACIDI NUCLEICI AUMENTO SINTESI PROTEICAAUTOFAGIA ED APOPTOSI SONO RESPONSABILI DEL RITORNO ALLA NORMA DOPO LA CESSAZIONE DELLO STIMOLO IPERTROFICO 146. ADATTAMENTO CELLULARE: IPOTROFIE 147. ATROFIA= riduzione acquisita nelle dimensioni delle cellule, dei tessuti o degli organi.IPOPLASIA = situazione congenita di deficitario sviluppo di un organo o tessutoAPLASIA = mancato sviluppo di un organo o tessutoINVOLUZIONE = riduzione fisiologica del volume di organiATRESIA = imperforazione congenita CAUSE DI ATROFIA - Ridotta funzione (atrofia da disuso) - Iponutrizione (atrofia da digiuno- da inanizione generale)- Ridotta irrorazione (da ischemia cronica da inanizione locale) - Pressione locale (atrofia da compressione) - Occlusione dei dotti escretori - Effetti ormonali- Invecchiamento (atrofia senile)- Denervazione 148. IPOTROFIA ALTERAZIONE DEL VOLUME DI UN ORGANO PER DIMINUZIONE DEL VOLUME O DEL NUMERODELLE CELLULEATROFIA VOLUMETRICA ATROFIA(autofagia, idrolasi lisosomiali) NUMERICA (apoptosi) CELLULE STABILI CELLULE LABILI 149. AUTOFAGIAIl termine deriva dal greco e significa mangiare s stessiE un processo di auto-degradazione lisosoma-mediatoEsistono tre tipi di autofagia: macro-, micro-autofagia e autofagiachaperone-mediataNella microautofagia porzioni di citosol vengono sequestrate e degradatedirettamente dai lisosomiLautofagia chaperone-mediata richiede il riconoscimento di proteine lisosomialida parte di (heat shock protein) Hsp70 e Hsp73E il principale meccanismo di regolazione del turnover di elementi citosolici eOrganelli, ma anche indotta rapidamente da stimoli quali la starvation e ladeprivazione di fattori di crescita 150. DIFFERENZIAZIONE SVILUPPOFISIOLOGICHE INVOLUZIONI SENILIATROFIE PATOLOGICHE 151. ATROFIE FISIOLOGICHERIMODELLAMENTOARCHI AORTICI PRIMA DELLADOTTI WOLFF E MULLER NASCITAATROFIADIFFERENZIAZIONEAPPENDICESVILUPPO TIMO DOPO LA UTERO DOPO MENOPAUSA NASCITA INVOLUZIONI SENILI 152. ATROFIA SENILE DEL CERVELLOS. Di Werner: S. Hutchinson-Gilford:Mutazione elicasi Mutazione genen Lamina A della membrana nucleare 153. INANIZIONEA. DEGENERATIVE INFIAMM.A. DA DENERVAZIONEATROFIE PATOLOGICHECOMPRESSIONEIPOFUNZIONEDA CAUSE CHIMICHEE FISICHE 154. ATROFIE DA INANIZIONE IN RAPPORTO A DIMINUZIONE O SOSPENSIONEDELLA NUTRIZIONETESSUTO ADIPOSO MUCOSE STOMACO E INTESTINO TESSUTO LINFATICO FEGATO CUTE TESSUTO MUSCOLARE 155. ATROFIE DA INANIZIONE LOCALEEXTRAVASCOLARIINTRAVASCOLARICOMPRESSIONE TROMBOSI EMBOLIE ENDOARTERITI TUMORIINFIAMMAZIONEESSUDATICORPI ESTRANEI 156. ATROFIE DA DENERVAZIONE 157. INVECCHIAMENTO 158. ATROFIA DELLA TIROIDE NELLA TIROIDITE DI HASHIMOTO (malattia autoimmunitaria) 159. METAPLASIA = sostituzione di un tessuto differenziato di un certo tipo conun tessuto differenziato di tipo diverso.In teoria ogni cellula possiede un patrimonio genetico completo per cui potrebbe trasformarsi in qualsiasi altro tipo di cellulaIn pratica nei mammiferi adulti la metaplasia pu avvenire soltanto fra tessuti epiteliali oppure soltanto fra tessuti mesenchimaliMETAPLASIA EPITELIALE (frequente negli epiteli di rivestimento)- metaplasia squamosa- leucoplachia- metaplasia ghiandolareMETAPLASIA CONNETTIVALE- m. ossea del tessuto connettivo- m. condroide- m. mixoide- m. del tessuto adiposo 160. Letture consigliatewww.pubmed.orgPontieri Patologia Generale Piccin Nuova Libraria S.p.A.Robbins Le basi patologiche delle malattie 7.a Ed. Elsevier ItaliaRubin Patologia 2006 Casa Editrice Ambrosiana